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【第二届网络原创参赛作品】一些处理区带毛细管电泳柱子的方法！

sunpengwjh

2009/10/22

毛细管电泳（CE）

一些处理区带毛细管电泳柱子的方法

1、开毛细管电泳柱子的检测口
购买来的柱子要上仪器，第一步就是量取好所需长度，开检测口。
先介绍一下开检测口的方法：
（1）用刀片刮去毛细管柱子的表面涂层2mm如图1、2；

（2）用火烧去一部分涂层；将要开检测口的两端用铝薄片包上，留出2mm，放在火焰上烧取表层，看见柱表面变黑，撤走火焰，用酒精棉擦去炭化的表层即可。
（3）用硫酸出去一部分涂层，此法硫酸腐蚀性强，处理起来不方便，不建议用此法！

2、毛细管电泳柱子的前处理方法
分为国内柱子和随国外仪器配备的柱子。
（1）国内柱子处理步骤：
先用1M的盐酸冲洗半个小时左右，然后再用1M的氢氧化钠冲洗30分钟左右，0.1M的氢氧化钠冲洗到基线基本平直为止，之后用水去离子水冲洗柱子，最后用缓冲溶液平衡柱子，这样柱子很好用！

由于毛细管裸管的表面是硅氧键的形式存在，活化的目的一是冲去柱子内的污垢如一些固体附着物等如图3，另外一个更重要的原因是打开硅氧键，生成硅羟基，在缓冲溶液里面硅羟基可以生成双电层如图4，是产生毛细管电泳的驱动力电渗流的原因，其实毛细管电泳仪是电泳和电渗共同作用的结果，从而达到使部分带电性差异物质更好的分离，即引入分离的因素。

（2）国外柱子（购买仪器时所配的柱子）处理步骤：
先用甲醇（色谱纯）冲洗柱子3分钟，主要是去除毛细管柱子中的酯类物质，用去离子水冲洗柱子1分钟，用以去除甲醇，用0.1MNaOH冲洗柱子冲洗30分钟，用来平滑管壁，活化毛细管内壁的硅羟基，去离子水冲洗1分钟，去除NaOH，最后同国产柱子一样用缓冲溶液冲洗柱子。

3、样品之间毛细管柱子的冲洗平衡
（1）进样前先用缓冲溶液清洗，以保持毛细管的清洁及缓冲溶液与毛细管内壁的平衡
（2）在运行10-20个样品之后最好换在以0.1MNaOH冲洗，用水清洗毛细管柱子，用以去除毛细管内壁吸附物质，然后再用缓冲溶液平衡！

4、实验结束后的毛细管柱子的处理：
实验结束后，如果很长时间不使用毛细管柱子应先用水清洗柱子5分钟，然后换上空瓶，吹干毛细管柱子！

5、取出毛细管柱子使用时，如果发现毛细管柱子堵了，可按如下方法处理：
（1）取下堵塞的柱子，先将柱子两端分别截掉2mm左右的长度，然后用仪器的压缩泵吹吹试试，进样端方上缓冲溶液，出口端放一空瓶，看看能不能通，如果不通我们在采用下一个步骤；
（2）仪器本身吹不通，我就可以用钢瓶在试试，刚瓶的压力能大一些；
（3）还可以采用手动泵的方法，将柱子于手动泵连接在一起放在超声里边，如果柱子不是出厂的问题，这个方法最能解决问题

精
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分
该帖子已被版主-独钓寒江雪加15积分，加2经验;加分理由:期待继续

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i_am_ling

第1楼2009/10/22

斑竹总结的很全面，讲的也很详细！谢谢斑竹和大家分享

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spying

第2楼2009/10/22

好作品，这回柱子出现问题就可以处理了！

0

zhuzhe

第3楼2009/10/22

斑竹总结的很全面，对电泳有很深的研究奥！哈哈

0

社区=冬季=

第4楼2009/10/22

表面涂层是铜吗？

0

sunpengwjh

第5楼2009/10/23

聚酰亚胺涂层！

0

小雨哥

第6楼2009/10/23

版主越来越厉害啊！总结的太还好了，受益匪浅呢！谢谢了啊！

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sunpengwjh

第7楼2009/10/23

好久没有看到楼上这位兄弟了，最近忙什么呢？
zhchyu 发表:版主越来越厉害啊！总结的太还好了，受益匪浅呢！谢谢了啊！

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double1125

第8楼2009/10/23

顶一个！
写的好好啊！

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乘桴浮于海

第9楼2009/10/23

再顶一个！

0

spfeng

第10楼2009/10/24

很好，总结的很全面。在实际中能用的上！顶一个！！

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