仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【讨论】奇怪,异丙醇反冲柱子后压力反而上升!

液相色谱(LC)

  • 一直做中药中的一个有毒成分,供试液是用氯仿提取的,所以提出来的非极性杂质很多,对柱子影响较大。从10月份到现在,图谱重叠,明显看到峰在慢慢变矮,峰宽增大。不管是标准品还是样品的主峰后边都拖了一个小杂峰,柱效高的时候,分离度能达到2,现在渐渐不行了,达不到要求了。每次实验完了以后都用乙腈或者甲醇跑梯度全流程冲柱子,还是不行~~中药太脏了,污染严重。大家有好的建议吗?想尝试用异丙醇或者其他非极性高的有机溶剂冲柱子,但又怕柱子坏掉,不敢轻举妄动~~~


    我先用甲醇或乙腈正冲柱子较长时间,柱压不升反降!于是,我用纯异丙醇反冲柱子0.2的流速,40min,压力90bar;完了以后,用0.2流速的甲醇反冲置换异丙醇,压力正常24bar;我以为好了呢,但是正冲后压力又升上去了34bar,比之前更高~~这到底是什么原因呢?


    以前遇到过这种情况:用甲醇冲完柱子以后压力正常,然后上高比例乙腈,冲了一会后,压力陡增至仪器报警;调低流速后继续冲,结果压力慢慢升至240bar又降至正常压力130bar。怀疑是不溶于甲醇的东西吸附在柱头,用乙腈冲时,溶于乙腈,带入柱子导致压力升高(仅为猜测)!
    +关注 私聊
  • 哇咔咔

    第1楼2009/12/15

    可以用异丙醇和二氯甲烷冲一下.
    中药的话,还是加个保护柱吧.可以延长柱子寿命.

0
    +关注 私聊
  • 青橙

    第2楼2009/12/15

    楼上能不能说清楚点,要是用异丙醇,用多大的流速、冲多长时间?会不会损害柱子?
    有预柱,但还是柱效降低的很严重。

0
    +关注 私聊
  • 有水有渝

    第3楼2009/12/15

    应助达人

    可以问一下色谱柱生产商能不能用氯仿反冲,如果正冲可能使强保留物质更往色谱柱中部前进,同时反冲还能冲掉筛板上的沉积物。

0
    +关注 私聊
  • hwjhx0322

    第4楼2009/12/16

    可以尝试一下用相同极性的流动相来冲洗一下,流量根据柱压上限来定.还不行的话,可以反冲,但具体用什么流动相就要问一下柱子生产商了.

0
    +关注 私聊
  • syp12h

    第5楼2009/12/16

    一般用色谱甲醇或色谱乙腈冲柱子,冲一天或更长的时间(流速0.5-0.8左右),流速可调低。要是短时间冲的话,流速在3-5,这样冲应该没问题的啊

0
    +关注 私聊
  • 小丶风

    第6楼2009/12/16

    反冲治标不治本的,反冲完了可能会好点,时间不长就不行了,看看能不能改善一下前处理方法吧,多去去杂质!可能会麻烦一些,但是对柱子有好处

0
    +关注 私聊
  • 青橙

    第7楼2009/12/16

    嗯,正在用甲醇长时间冲柱子,不行的话打算上异丙醇试试。隔壁实验室有个同学用异丙醇冲柱子解决过峰分叉的问题~~~

    syp12h(syp12h) 发表:一般用色谱甲醇或色谱乙腈冲柱子,冲一天或更长的时间(流速0.5-0.8左右),流速可调低。要是短时间冲的话,流速在3-5,这样冲应该没问题的啊

0
    +关注 私聊
  • 青橙

    第8楼2009/12/16

    异丙醇冲柱子:用甲醇过渡,根据柱压确定流速,可以从0.05的流速开始冲,等柱压稳定了,慢慢升高流速至0.1,柱压稳定后再提高到0.2,冲30至40min后(2个柱体积),再用甲醇置换柱子里的异丙醇。时间不宜长,流速不宜快!时间长了会把键合相洗脱掉,流速高了压力太大,会把柱头冲塌。这个是以往同学的经验,我还没试过呢。

0
    +关注 私聊
  • 哇咔咔

    第9楼2009/12/16

    基本就是这样.我们一般都冲1个小时.异丙醇后还可以加上二氯甲烷,流速主要就是看压力来定.对柱子没什么影响.

    chengf3526(chengf3526) 发表:异丙醇冲柱子:用甲醇过渡,根据柱压确定流速,可以从0.05的流速开始冲,等柱压稳定了,慢慢升高流速至0.1,柱压稳定后再提高到0.2,冲30至40min后(2个柱体积),再用甲醇置换柱子里的异丙醇。时间不宜长,流速不宜快!时间长了会把键合相洗脱掉,流速高了压力太大,会把柱头冲塌。这个是以往同学的经验,我还没试过呢。

0
    +关注 私聊
  • 青橙

    第10楼2009/12/16

    呵呵,谢谢feixue810316
    二氯甲烷就暂时不用了。先用异丙醇试试~~

0
查看更多
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...