【每日10分】正相色谱和反相色谱的区别？

应助达人

这个问题太简单了，从原理上说，他们就是固定相的极性和流动相的极性哪个大的问题了。

huaibeijiayuan：土豆认为简单，就增加了一个题目。
土豆：晕倒，还有附加题的啊，这个切换是说从正相切换到反相还是什么意思啊？

本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明：
1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
2、反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

应助达人

正相色谱法　采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相)；流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。
反相色谱法　一般用非极性固定相（如C18、C8）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛，据统计，它占整个HPLC应用的80%左右。
正相色谱法与反相色谱法比较表
正相色谱法 反相色谱法
固定相极性 高～中 中～低
流动相极性 低～中 中～高
组分洗脱次序 极性小先洗出 极性大先洗出

切换就是换柱子换溶剂，用异丙醇过渡？

其实就这么简单,如果说的切换,就复杂了,流动相要过渡,柱子也不一样

这也不一定,根据流动相来变的

应助达人

总结的较好.让人一看便懂.

张驰有度　和　andychan59　把第一个问题回答得差不多了，关键是第二个问题，俺很想了解一下。
一般情况下，我就是先有用异丙醇等过渡溶剂清洗一下管路，然后换上柱子，再清洗到平衡。别的我就不清楚了，我用正相色谱很少！