【求助】求助：检测样品柱子中没有保留？？

调节流动相比例，PH值，还是没保留就换成HILIC柱子做

楼主用的什么柱子？

很简单，降低流动相中有机溶剂的比例即可（对反相HPLC）。每次降低10%。

调节流动相比例

我用的是C18的柱子，流动相：A液是甲醇，B液是0.05%的甲酸水，梯度洗脱，各位大侠给点建议，先谢谢各位了！

应助达人

梯度的起始比例是多少，出峰应该不是很快。

用的是梯度 起始30%A -70%B ，2-15min时90%A 10%B ， 保持5min ，20-25min变回30%A 70%B 再保持5min

应助达人

摘　　要:目的：建立用高效液相色谱法测定疤痕止痒软化乳膏中水杨酸甲酯含量的方法。方法：采用Shim-pack VP-ODS(4．6×150mm，5um)色谱柱，流动相：甲醇-水(65：45)，流速：1．0mL·min^-1，检测波长：302nm，柱温：40℃，进样量：10μL。结果：线性范围：0．6724～6．3878μg，r=0．9999。平均回收率：101．35％，RSD=1．69％(n=6)。结论：本法分离度好，快速、简便。适用于疤痕止痒软化乳膏中水杨酸甲酯的含量测定，可作为产品的质量控制方法。

这个用的是甲醇-水(65：45)，所以没可能你的30%这么快就出来了啊。唯一 的区别是就加了酸了，你没加酸或少点酸看看结果如果。