【求助】求助：HPLC问题！

是不是柱头污染了啊？
多冲冲柱子

试剂用的是分析纯，纯度不够，所以有杂质峰，你改用色谱纯试试。

应助达人

“走空针”也就是走空白作对照吧，有杂质峰也是正常的啊，只要在走样后，从样品图谱中剪掉对照中的溶剂峰不就行了嘛!
再者做液相注入系统中的有机溶剂要求都是色谱级的，缓冲盐要求是优级纯。如果不是不仅影响实验结果，而且对液相系统带来损坏。

乙腈用的默克的
缓冲盐0.45微米过滤。
自己配的，怎么才能知道是什么级别的呢？
梯度洗脱没办法，好像真的总是有峰，现在跑样了，先剪掉。谢谢各位

柱子洗2个小时，再试试

梯度出峰很正常

应助达人

1、你的梯度是怎么变化的，是不是变化太大？
2、试剂有没有污染，特别是水。
3、色谱系统可能被污染，清洗管路。

流通池不知道怎么排除影响？柱子，流动相应该都没问题，PH=6.5也没问题。
每次到流动相B升到100%的那段时间会出来很多峰，走空针的时候。也不知道是为什么了。

这个是正常现象，梯度引起，扣除即可。