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【分享】吸光度出现负值——新手易遇到的问题

tutm

2010/01/25

紫外可见分光光度计（UV）

近来查一些资料，看到去年8月份河南新乡学院的一篇文章，写的是使用分光光度计“吸光度出现负值的原因分析”，摘编一些内容，给初涉使用仪器的同行参考。

吸光度出现负值的原因分析
-
仪器：
722 、722N、754 等型号分光光度计
-
现象分析：
1) 学生使用新的分光光度计测定时几乎没有出现吸光度负值的现象;在旧仪器上测定时普遍出现吸光度负值的现象。
2) 同样的仪器,老师测定的时候几乎也没有出现负值的现象。这说明不是仪器本身的质量问题,而是操作者的问题。
-
解决方法：
1) 比色皿必须配套使用。无论玻璃比色皿还是石英比色皿,同一套的原料质地相同,厚薄相同,所以透光度也（基本）相同;如果不是同一套比色皿,透光度会有差别,将影响测定结果。所以,比色皿不（应）能混合使用。
2) 比色皿必须保持洁净。比色皿不洁净会引起测量误差,在可见光区域,指纹对光的吸收相当强,因此不得用手直接触摸比色皿的透光面,测量前必须用专用擦镜纸揩净比色皿表面,每次使用后必须将比色皿清洗干净。
3) 把比色皿放入托架中时,应确保不倾斜。否则,就会使参比样品与待测样品的吸收光路径长度产生较大误差,还可能使入射光不能全部通过比色池,导致测试比准确性不符合要求。
4）在测试样品的过程中,比色皿架推拉到位,当拉杆到位时有定位感,到位时,前后轻轻推动拉杆以确保定位准确。
-
比色皿维护：
1) 使用后立即将皿中液体倒空,用适当的洗涤剂洗涤,蒸馏水冲洗后,最后用无水乙醇冲洗干净。
2) 比色皿应存放在原装盒中,确保其表面不受污染和腐蚀。
3) 定期用稀酸清洗比色皿,若效果不好,则可将比色皿浸泡在浓盐酸∶甲醇∶水= 1 ∶4 ∶3的混合液中,于通风橱内放置1 h 后冲洗干净。

分
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初学者&九点虎

第1楼2010/01/25

有些试验比色后直接用水洗就可以，因为吸附的还没那么快
非常感谢屠老师分享

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tutm

第2楼2010/01/25

呵，这些是刚开始使用的朋友看的，有使用经验后自然就成良好习惯了。估计初始使用的学生都遇到过。
初学者&九点虎(zhouyuhu) 发表:有些试验比色后直接用水洗就可以，因为吸附的还没那么快
非常感谢屠老师分享

0

cjz19871029

第3楼2010/01/25

我遇到的更恐怖，不管哪个溶液都是0的，外面看上去都像空白的，晕，一点颜色也没，不知道怎么回事！

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tutm

第4楼2010/01/26

那可能是你的样品溶液配制（显色）问题了，不是仪器的操作问题。
是不是样品太稀了？
cjz19871029(cjz19871029) 发表:我遇到的更恐怖，不管哪个溶液都是0的，外面看上去都像空白的，晕，一点颜色也没，不知道怎么回事！

0

qxqin

第5楼2010/01/27

是不是显色剂的问题，再看看显色的条件

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