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【讨论】使用带缓冲盐的流动相前后该注意的事项!

  • penglin1984
    2010/02/05
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 朋友们,为了分析的需要,我们有时会在流动相里增加很小比例的缓冲液,如磷酸缓冲盐之类的。对于带盐的流动相,试验前后对于色谱柱的处理,大家的意见如何?我是这样做的:每次做完试验,冲完柱子后,都是用100%的甲醇或乙腈将色谱柱保存起来。试验分析要用带有磷酸缓冲液的流动相,如乙腈:磷酸缓冲液=30:70,开机后先用不带盐的流动相如甲醇:水=5:95冲洗,先把纯甲醇试剂替换出来,大概20min左右,把流动相换成试验用的带磷酸缓冲液的流动相,平衡色谱柱,待基线平稳后再进样。每进完一针,走一下基线,平衡后再进针。所有分析结束后,先用不带盐的流动相(甲醇:水=5:95)冲洗60min,再用纯甲醇冲洗30min,再保存。不知道大家的意见如何?谢谢!
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  • lanbing08

    第1楼2010/02/05

    差不多就这样子吧,反正要把盐分给冲洗干净!!这个很重要!

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  • 宁夏恋冰

    第2楼2010/02/05

    应该这样吧,我们也是这样做!不过样品不同,有时候冲的时间很长压力也降不到最初状态!

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  • 楚无伤

    第3楼2010/02/05

    差不多就是这样
    反正原则是把盐冲洗出来
    最后的冲洗流程建议甲醇:水=5:95冲洗15min,然后走梯度20min直到全部置换成甲醇,保持5min关机。

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  • hpy3965

    第4楼2010/02/05

    如果 你的柱子 可以耐受全水相 可以用100水 冲 会更好 时间更短

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  • 天天洗碗

    第5楼2010/02/08

    多冲一会对柱子寿命是有好处的,100水和甲醇:水=5:95冲洗区别很大吗?是不是太过小心了

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  • kila

    第6楼2010/02/14

    我可以很负责任地告诉你,我用磷酸盐缓冲液/乙腈/纯水(固定20%v/v)体系,和急变梯度,很快就损坏了一根柱子(每个色谱峰后出肩峰)。

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