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【讨论】使用带缓冲盐的流动相前后该注意的事项！

penglin1984

2010/02/05

液相色谱（LC）

朋友们，为了分析的需要，我们有时会在流动相里增加很小比例的缓冲液，如磷酸缓冲盐之类的。对于带盐的流动相，试验前后对于色谱柱的处理，大家的意见如何？我是这样做的：每次做完试验，冲完柱子后，都是用100%的甲醇或乙腈将色谱柱保存起来。试验分析要用带有磷酸缓冲液的流动相，如乙腈：磷酸缓冲液=30：70，开机后先用不带盐的流动相如甲醇：水=5：95冲洗，先把纯甲醇试剂替换出来，大概20min左右，把流动相换成试验用的带磷酸缓冲液的流动相，平衡色谱柱，待基线平稳后再进样。每进完一针，走一下基线，平衡后再进针。所有分析结束后，先用不带盐的流动相(甲醇：水=5：95)冲洗60min，再用纯甲醇冲洗30min，再保存。不知道大家的意见如何？谢谢！

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lanbing08

第1楼2010/02/05

差不多就这样子吧，反正要把盐分给冲洗干净！！这个很重要！

0

宁夏恋冰

第2楼2010/02/05

应该这样吧，我们也是这样做！不过样品不同，有时候冲的时间很长压力也降不到最初状态！

0

楚无伤

第3楼2010/02/05

差不多就是这样
反正原则是把盐冲洗出来
最后的冲洗流程建议甲醇：水=5：95冲洗15min，然后走梯度20min直到全部置换成甲醇，保持5min关机。

0

hpy3965

第4楼2010/02/05

如果你的柱子可以耐受全水相可以用100水冲会更好时间更短

0

天天洗碗

第5楼2010/02/08

多冲一会对柱子寿命是有好处的，100水和甲醇：水=5：95冲洗区别很大吗？是不是太过小心了

0

kila

第6楼2010/02/14

我可以很负责任地告诉你，我用磷酸盐缓冲液/乙腈/纯水（固定20%v/v）体系，和急变梯度，很快就损坏了一根柱子（每个色谱峰后出肩峰）。

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