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【求助】柱后衍生的原理及操作步骤

  • qingxin_0926
    2010/03/11
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 各位大侠,有没有人有液相色谱柱后衍生的原理以及操作步骤的?急用
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  • 有水有渝

    第1楼2010/03/11

    应助达人

    要有柱后衍生设备才行,衍生的原理都是一样的。

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  • 柏坡

    第2楼2010/03/12

    waters的有柱后衍生,以前用一次好像有个单独的泵。

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  • 有水有渝

    第3楼2010/03/12

    应助达人

    要有一个单独的泵用来输送配制好的衍生试液。

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  • qingxin_0926

    第4楼2010/03/12

    我们与液相链接的是一个带有双泵的,我看有三个试剂瓶,那两个装什么液体,液相的流动相吗?

    xky0230699(xky0230699) 发表:要有一个单独的泵用来输送配制好的衍生试液。

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  • qingxin_0926

    第5楼2010/03/12

    你好,具体的柱温度,流速的调制在哪里,液相色谱的工作站上有吗?还需要调那些东西啊?我初次使用也没有操作说明书,不知道该怎么做,请赐教,谢谢

    xky0230699(xky0230699) 发表:要有柱后衍生设备才行,衍生的原理都是一样的。

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  • pussyman

    第7楼2010/06/01

    你找到 了吗。我也需要

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  • 寒江雪

    第8楼2010/06/03

    HPLC柱前衍生和柱后衍生

    1、为什么要衍生?
    衍生化最为主要的目的就是提高目的物的可检测性。对于GC来讲,多数是为了增强目的物挥发性或者改善目的物极性;对于HPLC来讲多数是为了提高检测器对目的物的相应。
    2、衍生化分类:柱前衍生和柱后衍生。柱前衍生是在经过分析柱前使分析物与衍生剂反应,反应产物在分析柱上实现分离,实际分离的是衍生产物,检测的也是衍生产物;柱后衍生是分离物在分析柱中实现分离后,在衍生池内与衍生剂反应,在柱子中分离的是目的物,在检测器处检测的衍生产物。
    3、适用的化合物:生物酸/碱、胺类、抗生素(聚醚类抗生素多见)和氨基酸类。
    4、衍生化要求?
    1)衍生剂必须过量且稳定;不过量反应不完全,检测不充分。不稳定,重现性差。
    2)衍生物、衍生产物和衍生副产物至少是好分离的。当然如果只能检测到衍生产物最好。
    3)衍生反快速完全。反应慢,柱前衍生还可以,但柱后不行。因为流速固定,衍生池管路长度一定,留给衍生化的时间是一定的。柱前衍生可以在系统外等衍生完毕后进样,但也是影响效率的。
    5、两种衍生比较
    柱前衍生优点是,对设备要求不高,可以手工衍生,而且对衍生时间要求相对宽泛。缺点是,引入了过多的物质,如:衍生剂、衍生产物(当然这个是检测需要的)和衍生副产物,对柱子有潜在的负面影响,另如采用手工衍生也会引入过多的认为因素。
    柱后衍生优点是,重现性好,认为因素少,引入物质比较少。缺点是,可能有扩散问题,在柱子中分离结束后,就存在扩散,如果衍生慢(必然流速低)、管路长扩散问题就会比较严重,再有就是要求有一套外源的泵系统和一个检测池,对于设备要求较高。

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  • 有水有渝

    第9楼2010/06/03

    应助达人

    要知道设备的具体型号,或者可以联系售后工程师看看能不能给你一份电子版的说明书。

    pussyman(pussyman) 发表:你找到 了吗。我也需要

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  • starzjyzjy

    第10楼2010/06/03

    很简单的阿?衍生试剂配置好, 就设个流速,一般0.3-0.5ml/min,还有就设个反应温度就可以了阿。具体看你柱后衍生分析什么物质阿?

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