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【求助】发现柱压下降,现试图反冲柱子?

  • dongfang16
    2010/04/26
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 高效液相出现双峰重叠
    对照品是腺嘌呤和枸橼酸,供试品为CPDA1

    昨天流动相缓冲液是磷酸缓冲液,用的是磷酸氢二钠4.5g,磷酸二氢钠1.6g,二硫酸四丁基胺0.3g,+900ML注射用水用磷酸调PH到2.5(PH计确认无误),加水至1000ML,和HPLC级甲醇15:85混得流动相。

    今天也是同样配了2000ML。先使用昨天配的流动相稀释和平衡柱子(排除清洗操作和稀释的浓度问题)

    昨天使用时出峰很正常但是下峰收尾略拖长,但是今天出现双峰重叠现象,起初伴有平头峰,量程问题已经解决,但腺嘌呤和总枸橼酸依然重叠,枸橼酸对照品提前出峰(时间和腺嘌呤相近),是否是流动相问题,但是若是流动相问题昨天做液相出图很正常,分离的很好,还是缓冲液冰箱里放过夜失灵??

    求解~ 问题补充:发现柱压下降,现试图反冲柱子,不知道有么有效果
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  • sarge

    第1楼2010/04/26

    重配流动相吧,柱压下降为什么要反冲柱子?柱压偏高才反冲的。

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  • 有水有渝

    第2楼2010/04/26

    应助达人

    可能是色谱柱污染了,用的是C18柱的话,用水和乙腈多清洗一下,离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显,尽量缩短检测时间,做完后立即清洗色谱柱。

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  • 柏坡

    第3楼2010/04/26

    流动相还是现配现用的好,反冲柱子一般是在柱子有污染的时候或是柱压偏高时再生时常用到。反冲 不是反用

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  • rainbowchem

    第4楼2010/04/27

    重新配流动相冲一下,你柱子用多长时间了,可能是柱子不行了,换保护柱试一下!反冲对柱子损害太大的

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  • 天天洗碗

    第5楼2010/04/27

    做完后立即清洗色谱柱估计也很难讲离子对试剂完全冲洗干净,其对色谱柱的危害是不可修复的吧

    有水有渝(xky0230699) 发表:可能是色谱柱污染了,用的是C18柱的话,用水和乙腈多清洗一下,离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显,尽量缩短检测时间,做完后立即清洗色谱柱。

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  • linzhengjiu

    第6楼2010/04/27

    用磷酸盐作流动相时做完样一定要用水冲洗干净,磷酸盐要现用现配而且建议用0.2微米的滤膜进行过抽滤

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  • 〓猪哥哥〓

    第7楼2010/04/27

    柱压降低,不是盐析出,应该不需要反冲,应该是有残留,用水-乙腈多冲洗下

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  • qz

    第8楼2010/04/28

    可以调节流动相比例的,并不需要反冲柱子

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  • zxj1040

    第9楼2010/04/28

    柱子不到万不得已,
    最好不要反冲,这样会对柱床产生影响
    最好清洗干净后,再调节流动相比例

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  • 尽力而为

    第10楼2010/04/30

    缓冲液不会一夜就过期的,建议略调节甲醇比例可以得到很好的分离,柱压下降,峰后移的,估计你以前分离度也不是很大吧

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