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【求助】怎样调整峰形(急)

  • lihuasmile
    2010/05/05
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 小弟用液相做丹参素的含量测定,丹参素钠标准品用甲醇溶解,浓度0.5mg/ml,进样量20微升,色谱条件是甲醇-乙腈-2%冰醋酸水溶液5:5:90,保留时间大约在9min左右,是小弟想得到的保留时间,但是在此色谱条件下峰形较差(如图),峰前面塌陷(不知道有什么专业术语形容?),急求各位朋友、老师、前辈指点迷津,小弟不胜感激!


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  • 海边

    第1楼2010/05/05

    这叫前延峰。
    在标样中加点冰乙酸试试,或者增大乙腈比例试试。

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  • 有水有渝

    第2楼2010/05/05

    应助达人

    这个是药典上的方法吗?

    丹参素钠


      【英文名称】Salvianic acid A sodium
      【化 学 名】3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-hydroxypropanoate
      【C A S 号】23028-17-3
      【来 源】唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge.和甘西鼠尾草的根。
      【物理性质】为白色针状结晶, 溶于甲醇、水,不溶于氯仿、乙醚。 熔点255~258°。

    看看用流动相溶解行不行,可能受到溶剂效应影响,如果用流动相溶解后还是一样,那就只能换色谱柱,前延峰除受溶剂,样品本身性质,色谱柱的影响也很大。同时检查一下管路有没有死体积等。

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  • lihuasmile

    第3楼2010/05/05

    这个是依照文献上做的,药典的方法是甲醇-1%乙酸水溶液12:88,但是出峰时间过早,为四分钟左右,峰形还是像上图那样,前延峰。。。。。。

    有水有渝(xky0230699) 发表:这个是药典上的方法吗?

    丹参素钠


      【英文名称】Salvianic acid A sodium
      【化 学 名】3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-hydroxypropanoate
      【C A S 号】23028-17-3
      【来 源】唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge.和甘西鼠尾草的根。
      【物理性质】为白色针状结晶, 溶于甲醇、水,不溶于氯仿、乙醚。 熔点255~258°。

    看看用流动相溶解行不行,可能受到溶剂效应影响,如果用流动相溶解后还是一样,那就只能换色谱柱,前延峰除受溶剂,样品本身性质,色谱柱的影响也很大。同时检查一下管路有没有死体积等。

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  • 有水有渝

    第4楼2010/05/06

    应助达人

    那就建议用流动相溶解试试,如果不行,换色谱柱吧。

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  • 1818

    第5楼2010/05/07

    有可能是样品量过载,减少进样量试试看!!!

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  • cjhck

    第6楼2010/05/07

    从响应值看有过载吗?从峰形看有过载吗?

    xyhdcm2002(xyhdcm2002) 发表:有可能是样品量过载,减少进样量试试看!!!

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  • fobhcff

    第7楼2010/05/07

    峰前延一般是柱头污染,可以反冲色谱柱试一下

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  • lihuasmile

    第8楼2010/05/07

    可是我做其他的物质都没有前延峰的现象啊~

    fobhcff(fobhcff) 发表:峰前延一般是柱头污染,可以反冲色谱柱试一下

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  • 〓猪哥哥〓

    第9楼2010/05/07

    说明柱子是没有问题的。
    溶解样品溶剂,最好加入适量的水(流动相)及减少进样量试试

    lihuasmile(lihuasmile) 发表:可是我做其他的物质都没有前延峰的现象啊~

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  • 徐有才

    第10楼2010/05/09

    你是用甲醇溶的样品吗?可以考虑用乙腈溶啊 还有醋酸的比例可以考虑增大一点·

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