【求助】保留时间问题

应助达人

是不是比例阀有问题，有时乙腈那个通道不通了，没乙腈或其量减少，使保留时间推迟，建议清洗一下管路并做一个梯度准确度检查。

原因分析：
1.乙腈比例太小，导致色谱柱不稳定
2.比例差距太大，混合不匀
建议按比例配好流动相，单泵走流动相试试。

谢谢所给与的原因分析，很有道理。请问梯度准确度检查怎么做？

应助达人

2.2.2 梯度准确度的确认
2.2.2.1测试条件：
流动相：0.3%丙酮-水 检测波长：254nm
流速：1.000ml/min 柱温：30℃
2.2.2.2 测试方法：
按下表设置梯度洗脱程序，以两通（有阻尼管更好）代替色谱柱连接管路，先用超纯水冲洗系统，待基线平稳后开始执行梯度程序，画出梯度变化曲线。测定三次，取各梯度级高度的平均值，由曲线图测量100%B（C）梯度级平均高度计算各梯级实际体积%，每个梯级的理论体积%和实际体积%之差即为梯度准确度，以最大差值为梯度准确度误差。
梯度洗脱表

谢谢了，回头试试做一下。