【求助】722分析结果误差大

在最大吸收波长下测量，一是灵敏度最高，二是峰值附近较小区域曲线平坦，你调波长时精密略差一点，不同溶液的波长微有波动（事实上调好波长后，对一组标液的测定是不应反复调整），吸光系数基本不变，故基本不会影响测定结果。但若你取第二波长来测定，该波长不在峰值处就在峰腰处，则对于微小的波长变动将会产生明显的吸光系数的变化，从而影响测定结果（如果反复调的话）。
以上所言指手动调波长的仪器，如果是软件控制（界面输入波长数据），这个问题应该能够避免的。
如果是手动调波长的仪器，你每改变一次波长，都要重新调整仪器零点，空白值，才能正式测量试液和标液。

我的光度计是手动调波长，每次调波长我重新都做过空白，结果还是相差很大，因为不同的络合钴离子最大的吸收波长都不一样，我这个仪器没有扫描功能，也难精确的知道最大吸收波长，现在不知道怎么才能得到准确的结果。麻烦你再帮我指导一下，谢谢I

不知道你的显色剂是什么？是亚硝基R盐还是5-Cl-PADAB？钴的光度分析常见的显色体系是这两种。如果是这两种中的其中之一的话，那么你的问题是选取的另一波长落在了显色剂高吸收（高灵敏）的区域了，显色剂本来浓度就比钴大得多，更兼它的吸收比络合物更强，因而你测出的结果是把显色剂的吸收也当成钴的吸收，当然就比钴最大吸收时的浓度要高得多了。下面的吸收曲线是我从别人的文章中截图得到的，作了点标记，一看就知道问题所在了。

从图1可知，你若在络合物的最大吸收波长570nm处测定，显色剂已经有一点干扰了（产生正误差），不过用显色剂作参比，可以将它的误差减到最小；随着测量波长的降低，显色剂的干扰会越来越严重，例如，若将波长定在500-450nm，则吸光度A会急剧升高，这是显色剂的吸收了，当然不看图是不知道的.就不能再用A来对钴浓度定量了。

亚硝基R盐-钴的光谱曲线与图1类似，在络合物有吸收的很宽一段波长范围内显色剂都有吸收，你选的波长若在400-520nm间，测得的是显色剂和络合物的A合量，波长越短显色剂的干扰越严重，道理同前。不过当波长大于520nm，显色剂就没有吸收了，故若用此法测钴，应选530nm来测量，此时测量灵敏度略低一点，但完全消除了显色剂的干扰。
建议你选用第二方法测量。给你一份含钴矿石的钴测定资料，其中详细介绍了两个方法的原理和测定步骤，对其他含钴样品的测定是极有参考意义的。

非常赞楼上的分析。

我是测一种枪色的电镀药水，主要含有焦磷酸钾（络合剂）（320克/升），氯化钴（30克/升），焦磷酸亚锡（10克/升），我根据网上的资料“

摘要：pH=10的柠檬酸铵一氨水溶液中，钴与苦氨酸偶氮变色酸反应形成绿色配合物，其最大吸收波长为650 nlTl，表观摩尔吸光系数为2．62×104 L／(mol·cm)。在25 mL溶液中，钴含量在0～50Ix9范围内遵循比尔定律。样品分析表明，该法的相对标准偏差小于2％。”
用柠檬酸铵氨水比色，分析结果跟实际配制溶液相差很远，我想上楼那位大哥帮我分析以下几个问题：
1。氯化钴本色就显红色，经焦磷酸钾络合后变成蓝紫色，以上溶液可否不用柠檬酸铵缓冲，直接比色测定（我己试过，结果也不准）
2。做空白时，用纯水还是用焦钾和焦锡的混合溶液。
3。在整个可见光范围内，我发现纯水在不同的波长处，吸光度变化比较大，这个是否正常？
4。根据以上的标准溶液，用分光光度怎么测试才能使结果误差最小？
不胜感激！

（1）直接用钴的颜色比色测定是不行的，因为钴-水络合而显红色，水配位高达6级配位，配位数不同颜色会有差异的，另外，水合钴离子的粉红色灵敏度不高，第三，钴在碱性易氧化为三价钴（氢氧化钠中沉淀，氨水中络合，都要升价的），颜色就不再是粉红色。柠檬酸根对钴有络合作用，起到稳定的作用。
（2）做空白时，务必用焦磷酸钾和焦锡作空白（资料说，四价锡不与显色剂作用，但亚锡会不会作用没有资料报道，这表明焦锡会不会干扰，说不清，需做标准对照），要保持试液和标液条件一致。
（3）测纯水在不同波长下的吸光度值，你用什么作空白参考，如果直接测不同波长下的A而不用空白的话，短波下测会比长波下测的A值高，这可能是不同颜色的光辐射能量不同短波大长波小之故。但如果每次有空白调零点，水在可见光区的吸光度应该变化不大。
（4）钴在碱中易被空气氧化到三价钴，可能显色剂-钴（II）较稳定，显色后不会再氧化。你试液中的亚锡会不会水解（络合后不水解了？）这要考虑锡会不会干扰。严格控制测定波长，保持在645nm下测定，波长过小，显色剂干扰极严重。下面的文献可能你看过，再复习一下，当波长小于络合物最大吸收波长以后，显色剂的吸收明显增大，不宜再用于钴的测定（情况同前面的讨论）。另外，你的钴浓度不算低，一般光度分析的线性范围在低浓度区间，浓度过高会出现负偏离情况，结果偏低（你的结果严重偏高是因波长不当，把显色剂吸收当钴络合物吸收造成的），如果能用化学滴定法测定，你这个原浓度是可以满足要求的。
（5）如果你采用此法测定，你首先需要用不含钴的试剂溶液测一测光谱曲线，（不能作波长扫描就逐点测量吧），尤其要注意亚锡与显色剂会不会显色（在指定条件下），另外需要做钴与显色剂在含焦磷酸盐和不含焦磷酸盐条件下的测定对比，因为焦磷酸盐对钴、锡都有络合作用，它是否会抑制钴与显色剂的络合而降低灵敏度或不呈线性。第三，如果上述问题都解决了，测定条件可行，那就需要做该实际条件下的线性范围实验了，配一系列不同浓度的钴溶液，其他条件都相同，在指定波长下，测量A，作图，看线性如何，负偏离或正偏离的钴浓度边界点，确定测量的浓度范围。当然，再增加一些条件试验，你可以写一篇论文了，档次不高的论文也就这研究套路。
下面二图就是苦氨酸偶氮变色酸络合钴的光谱曲线