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【求助】求助:为什么GPC标样(PS)只出了4个峰?

凝胶色谱(GPC)

  • 现在做高聚物的分子量分布,因为是新手,所以很多问题不懂,我用的流动相是DMF和甲醇,标样ps上应该有5个不同分子量的物质但现在只出了4个峰,最小分子量的峰出不来,在4个峰后出了一个很大的倒峰,怀疑是不是被倒峰掩盖了,采用一根柱子或者两根柱子串联都是这种现象,请问这种情况应该如何处理啊?非常感谢各位的回答!
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  • 知足常乐!

    第1楼2010/06/23

    运行多长时间?

    会不会是最小分子量的那个峰还没有洗脱出来

    时间运行长点试试

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  • tigertooth

    第2楼2010/06/23

    首先要确定柱子的分离限和标样的分子量是否匹配。也就是标样的分子量要在分离限之内。

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  • wlj99

    第3楼2010/06/24

    标样的分子量在分离限之内,现在我换了四氢呋喃,标样可以出来5个峰了,但是峰高只有原来的十分之一,且峰形拖尾,有时候倒峰很大,在做的过程中老是出现压力不稳的问题,昨天将单向阀超声后好了,今天又压力不稳了,郁闷啊!是不是四氢呋喃容易产生气泡呢?大家在做的过程中有什么经验分享一下啊!非常感谢!

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  • tigertooth

    第4楼2010/06/24

    THF要脱气,流动相不脱气也会造成泵不稳。最好有在线脱气机。

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  • wlj99

    第5楼2010/06/24

    我们已经脱气处理过了,听工程师说四氢呋喃对仪器单向阀有不良影响,但是GPC经常使用四氢呋喃作流动相,大家有没有这方面的经验呢?真诚请教!

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  • tosohsh

    第6楼2010/07/01

    通常使用的GPC柱子里的填料都是PSDVB(聚苯乙烯-二乙烯苯),这种柱子在极性的溶剂DMF、甲醇中容易发生低分子部分的样品峰与溶剂峰交叠的问题。这是填料本身的性质决定的,解决办法是换柱子,使用甲基丙烯酸酯类的柱子,比如TSK的Alpha和Super AW系列。这种柱子是专为DMF、NMP等极性溶剂体系开发的。

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  • superwml-1

    第7楼2010/07/07

    用四氢呋喃做流动相柱温不能太高
    我们用的也是四氢呋喃流动相,没有在线脱气机,但压力还是蛮好的,每次开机后要排空一些时间,就ok了,如果再不好就要对单向阀进出推流动相,那样效果也很好。

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  • wlj99

    第8楼2010/07/13

    多谢大家!请问大家在使用国产色谱纯四氢呋喃的时候重蒸吗?如果不重蒸是不是会出一些杂峰啊?最近做的老是出现一些无规律的倒峰,是不是四氢呋喃中含有的水分、过氧化物什么的呢?

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  • 天空

    第9楼2010/07/28

    可以问一下楼主做的是什么高聚物吗??

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  • wlj99

    第10楼2010/08/24

    做的是PLGA的分子量分布,之前我们的柱子用过DMF-甲醇作为流动相,后来又改为四氢呋喃,不知道是不是之前流动相在柱子中有残留呢?但是我们用四氢呋喃冲了好久好久了,真不知道怎么回事。

    天空(5674473534) 发表:可以问一下楼主做的是什么高聚物吗??

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