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【讨论】高氯酸沉淀蛋白,对柱子影响多大?

  • wangjuan55
    2010/06/24
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 现在做血样,看文献有用高氯酸沉淀蛋白的,一般用量很少,比如血样1ml,加70%高氯酸0.2ml,过滤直接进样100ul。这样对柱子危害大么?能不能直接进柱子?谢谢高手指点。
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  • 有水有渝

    第2楼2010/06/24

    应助达人

    这个还要看你的色谱柱PH使用范围和流动相的缓冲能力,不知道有没有测过样品溶液的PH?

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  • wangjuan55

    第4楼2010/06/24

    我用的是迪马柱子,ph是1.5,用的流动相是甲醇,0.2%甲酸。样品溶液没测过,量太小了,ph纸测了一下是1左右,用ph计的话溶液根本不够用。我也就是无知者无畏,开始进过三次样。现在想想还是挺害怕、谢谢斑竹,真是辛苦啊。

    有水有渝(xky0230699) 发表:这个还要看你的色谱柱PH使用范围和流动相的缓冲能力,不知道有没有测过样品溶液的PH?

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  • 有水有渝

    第5楼2010/06/24

    应助达人

    这个方法是自己建立的吗?

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  • 1818

    第6楼2010/06/24

    如果PH太低了,柱子的使用寿命会很低的.

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  • wangjuan55

    第7楼2010/06/24

    看文献上有用这个方法的,所以就试了试。还是不用了。另寻他法吧。

    有水有渝(xky0230699) 发表:这个方法是自己建立的吗?

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  • wangjuan55

    第8楼2010/06/24

    嗯,谢谢、

    xyhdcm2002(xyhdcm2002) 发表:如果PH太低了,柱子的使用寿命会很低的.

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  • wangjuan55

    第9楼2010/06/24

    从理论的角度讲,这样对柱子损害大么?想想20ul的强酸性物质过了一遍柱子。。。。。。

    有水有渝(xky0230699) 发表:这个方法是自己建立的吗?

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  • 有水有渝

    第10楼2010/06/25

    应助达人

    这个损害要经过验证才知道,也就是耐用性试验,进上几百针样品,看看色谱柱效,分离度,峰形,峰面积等有没有什么变化。

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  • sjw428

    第11楼2010/06/25

    可以再把pH值调回来呀,沉淀离心,过后把pH调到中性

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  • wangjuan55

    第12楼2010/06/26

    呵呵,我敢拿这个做实验,弄坏了老板把我当老鼠放血了。

    有水有渝(xky0230699) 发表:这个损害要经过验证才知道,也就是耐用性试验,进上几百针样品,看看色谱柱效,分离度,峰形,峰面积等有没有什么变化。

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