【讨论】离子对色谱平衡时间比较长的原理？

一般不需要太久的时间，除非色谱柱极不干净！或者选择了不适宜的色谱柱（流动相）系统

是不是更换了流动相或者管路中有气泡存在

流动相脏，管路有气泡，色谱柱坏了，或者色谱柱和流动相选择不当

应助达人

排除了仪器的原因，离子对流动相平衡一般是会比其它常用流动相慢，原理我也不清楚，楼上的也没有回答到点子上。

做离子对色谱实验前进行平衡，其实就类似于气相色谱中，色谱柱涂覆固定液来制备分离柱的过程，也是需要较长平衡时间的。

开始冲柱子的时候，流出色谱柱的离子对浓度小于流入的浓度，因为一部分被保留在色谱柱的C18链上，越接近平衡时，流出和流入的离子对浓度也越接近，这样如果用紫外检测器并且在低波长检测的话，检测器的响应值或者说基线会一直向上飘，一直到最后流出的流动相里离子对浓度不再变化。一般采用长时间、低流速来平衡离子对色谱。

是不是因为离子对要与色谱柱的固定相充分作用导致的呢？从两个方面来理解：1、离子对与固定相作用后改变了色谱柱固定相的表面环境，从而使得待检测物质分离情况有了改变，即可以理解为离子对的加入实际上临时改变了色谱柱的性能；
2、正因为离子对与色谱柱的固定相有异于普通的甲醇/水，乙腈/水体系流动相的作用，所以，使用离子对对色谱柱的保养不利，使用后要充分冲洗

以上只是我的猜测：）

来学习的，自己不是很清楚，不过比较同意6楼的观点。

应助达人

综合5楼与6楼的，请教一点疑问，离子对试剂对色谱的损害是离子对试剂吸附在C18上没有洗脱下来呢，还是洗脱的时候把C18上原有的烷基也洗脱了？虽然看起来后者的可以性很小，毕竟要破坏一个键需要不小的能量。

回复楼上的：主要是离子对试剂没有清洗干净，残留在色谱柱里与C18链紧密结合，导致色谱柱相对柱效降低，保留变差。一般我做完之后用与流动相同比例的流动相（有机溶剂：水）进行24小时过夜清洗，最后再用纯溶剂冲洗。如果正常使用和维护的话，柱子不会损耗的太快，但是性能肯定是要下降的。

硅胶球上的C18烷基链一般不会掉，除非流动相里还有类似四氢呋喃一样的物质或者强氧化性的物质，并且用完后没有及时清洗，才会破坏键合相。