congcong
第1楼2010/08/03
4.讨论
4.1本实验的基本思路为:
微生物的稀释平板计数是根据在固体培养基上所形成的一个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成,且肉眼可见的子细胞群体这一生理及培养特征进行的。也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的一系列不同稀释液,并尽量使样品中的微生物细胞分散开来,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个菌),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。
在实验中通过配置不同浓度的培养基,用于所采集土壤样品中微生物的接种,经过培养后,进一步使用选择培养基对培养菌种进行培养,以达到分离各种微生物的目的。从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。进行分离时常用的方法有:1).简易单细胞挑取法;2).平板分离法。本实验采用的是平板分离法,其是普遍用于微生物的分离与纯化的方法。其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其他微生物生长的环境,从而淘汰一些不需要的微生物。
在进行纯化及培养后,对其所形成的菌落形态进行观察,发现许多菌落呈现的颜色、形态、透明程度,均有所不同,从而进一步进行革兰氏染色后观察,确定微生物的种类,可见培养菌种既有阴性又有阳性,从菌落计书数的结果来看,每种平板中的菌落数值均较大,由此可见土壤中微生物种类繁多。
4.2结果
3.2培养基中的某些组分对富集、分离和纯化特定的微生物有较重要的作用
在固氮菌分离中所用两种培养基分别为:阿须贝固体培养基、酵母膏-阿须贝固体培养基。酵母膏-阿须贝固体培养基含有少量的氮元素,对固氮微生物和对氮元素含量要求不高的微生物有富集、分离的作用。在阿须贝固体培养基其中不含有氮元素则通过影印的方法将菌落转移进入后只有固氮菌可以在此培养基上生长。由此则分离、纯化出可以自身固氮的菌种。
4.3 实验菌落特征
4.3.1放线菌菌落特征:菌落干燥、不透明,表面呈致密的丝绒状,其上有一层彩色,主要为粉红色的“干粉”,菌落和培养基连接紧密,难以挑取,其正反面颜色不一致。正面为粉红色,而反面为乳白色,在菌落边缘的琼脂平面有变形现象。
4.3.2曲霉菌落特征:菌落较大,质地疏松,外观干燥而不透明,菌落与培养基连接紧密,不易挑取,其正反面颜色不同,边缘不整齐,其正面为淡黄色,反面为黄色。高度较高,隆起。
4.3.3青霉菌落特征:菌落较大,地疏松,外观干燥而不透明,菌落与培养基连接紧密,不易挑取,其正反面颜色不同,正面为浅绿色,反面为淡黄色,边缘不整齐,高度较高,明显隆起。
4.3.4根霉菌落特征:菌落无定形,为絮状,高度很高,覆盖整个培养皿,质地疏松,外观干燥为褐色、不透明。菌落与培养基连接紧密,不易挑取。
4.3.5脉孢霉菌落特征:其菌落大而外观干燥,不透明,呈现褐色,边缘不整齐,高度较高,菌落与培养基连接紧密,不易挑取。
4 . 4 实验中必须注意以下几点:
第一,为保证接种的成功,所用仪器必须彻底灭菌,接种时必须在无菌条件(即酒精灯火焰旁)下进行操作,以防止所接菌种被杂菌污染;
第二,需注意实验设计的基本准则:重复、随机、对照;
第三,在接种操作时管尖不能接触液面,每一个稀释度换一支试管。
咱们的编辑器有点不好用啊~~~格式编辑起来总是有那么点出入!不完全是所见即所得啊!!看来印证了一句话:看到的未必真实!!嘿嘿!