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【讨论】RPHPLC中亲水性大分子聚合物难以洗脱的原因

  • dacongyigen
    2010/08/10
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 经常见到资料说,反相色谱法中,亲水性大分子聚合物(蛋白质、核酸等)难以从色谱柱中洗脱,甚至是永久性的。
    反相流动相的极性较大,且多数水组分含量较高,按理应该更容易洗脱吧
    请问原因何在?
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  • 有水有渝

    第1楼2010/08/10

    应助达人

    楼主实际试验过吗,那些资料分析的物质或选择我色谱条件有没有什么特殊的地方。

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  • dacongyigen

    第2楼2010/08/11

    是这样子的,在岛津VP ODS色谱柱的注意事项上说的,他们要求,为了避免这种情况的出现,应该使用保护柱

    我没有试过,我觉得原因可能是大分子容易堵塞填料的微孔,从而导致柱效降低

    有水有渝(xky0230699) 发表:楼主实际试验过吗,那些资料分析的物质或选择我色谱条件有没有什么特殊的地方。

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  • 有水有渝

    第3楼2010/08/11

    应助达人

    一个与填料的孔径有关,还有一个可能是怕生物大分子在有机相中析出吧,我看很多蛋白沉淀剂都用乙腈什么的,没有做过这一类分析,建议你可以直接咨询岛津的色谱柱应用工程师。

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