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【求助】液相标准曲线建立问题？

wangjialin1810

2010/10/15

化学药检测

最近采用液相色谱-电化学检测器测定血浆和尿中的儿茶酚胺，不知各位有否这方面的经验，能否相互交流一下样品预处理条件和色谱条件，谢谢！

我有以下两个问题，希望大家能分享经验，谢谢大家。

1、标准曲线的建立方面，目前报道的文献大多采用溶液直接进样的方式，对于这种方法我有一点疑问：临床实际样品在处理过程中会有一个提取回收率的问题，当待测物与内标的提取回收率相同的时候，采用溶液直接进样的方式制备标准曲线或许可行，但事实上两者的提取回收率很有可能不一样（因为空白血浆不易获得，这一点无从考证），那么采用这种方法制备标准曲线的话，得到的结果肯定是不可靠的。但是我查了很多文献，包括国外的，大都采用这种方法，希望各位专家能给予指点。此外，也有一篇文献采用牛血清白蛋白配制模拟血浆来当作空白血浆，在将标准品加入其中，按照实际血浆样品处理过程同法处理来制备标准曲线。另外有文献将实际血浆用氧化铝吸附处理后的血浆当作空白血浆来制备标准曲线，但是操作很繁琐。个人觉得可以用牛血清白蛋白配制模拟血浆比较可行，但是毕竟改基质与实际的血浆不一样，这种操作是否切实可行，希望各位专家给予指点。

2、稳定性方面：
大部分文献表明儿茶酚胺在室温很不稳定（但也有文献说很稳定），目前配制储备液的方法主要有以下几种：1）直接用水配制2）加盐酸3）加高氯酸，关于稳定性方面，不知各位有何经验分享。

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往往外

第1楼2010/10/15

应助达人

楼主第一个问题，说的我有点迷惑~
待测物与内标的提取回收率？往下接着看。这个内标是内标法中内标物质？还是其他什么意思？？？？
如果是内标法中的内标物质的话，这个内标物还要回收率实验吗？？？

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wangjialin1810

第2楼2010/10/18

您的意思是可以采用溶液直接进样的方式来制备标曲？
寒冰(cxm2009) 发表:楼主第一个问题，说的我有点迷惑~
待测物与内标的提取回收率？往下接着看。这个内标是内标法中内标物质？还是其他什么意思？？？？
如果是内标法中的内标物质的话，这个内标物还要回收率实验吗？？？

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往往外

第3楼2010/10/18

应助达人

恩。是的。
我只是从你给的信息上可以这么看到，“当待测物与内标的提取回收率相同的时候”，内标物质可以不经前处理过程，标品和样品中都要添加的等量的物质，这个内标物在前处理之后添加也可以吧。而后面又查到的那个用牛血清白蛋白配制模拟血浆来当作空白血浆的文献上，指出的是模拟空白血浆加入标准品，这个时候必须要跟样品一致的处理过程。。。
这上下的对比是不一样的！！
个人理解，如果有不对的地方，请指正~

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wangjialin1810

第4楼2010/10/18

您好，您说的我还不是很明白，您的意思是可以直接进样做标曲吗？
寒冰(cxm2009) 发表:恩。是的。
我只是从你给的信息上可以这么看到，“当待测物与内标的提取回收率相同的时候”，内标物质可以不经前处理过程，标品和样品中都要添加的等量的物质，这个内标物在前处理之后添加也可以吧。而后面又查到的那个用牛血清白蛋白配制模拟血浆来当作空白血浆的文献上，指出的是模拟空白血浆加入标准品，这个时候必须要跟样品一致的处理过程。。。
这上下的对比是不一样的！！
个人理解，如果有不对的地方，请指正~

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往往外

第5楼2010/10/18

应助达人

嘿嘿，这只是我个人的猜测，我没有做过这个东西、。
据说这个东西的前处理过程就比较麻烦。。。希望坛子里有高手来解答~~

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