【求助】液相色谱 流动相问题

里面没有 有机溶剂，这样对柱子伤害大 C柱子都有规定的有机相不得小于10%
用的时候，先用有机相冲平柱子，然后用第一梯度平衡

问题1：憎水柱子（即反相色谱柱）如果用纯水冲洗后，如果立即停泵则由于其憎水（疏水）的缘故使得柱子内的水因而流失掉，长时间停泵使得柱子干掉（变干），会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷（也说成是失去支撑倒下），柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢？诶！不要惊慌，只要你不停泵，上述情况不会立即发生，我们只要保证最后用有机相冲洗柱子，停泵后使柱子内留存的是有机相，就无大碍，记住若遇到这种情况请不要停泵或者不要长时间停泵，而应立即过渡到有机相既可，另外还有长时间保存柱子是建议填料中充满乙腈，用乙腈保存C18反相柱子是最佳的，因乙腈为非质子型极性溶剂，为什么就不用我解释了吧。

问题2：我认为是说反了，你说的这个10%或50%过渡应该指的是液相使用中用含有缓冲盐的流动相，用完后如何清洗色谱柱的问题。我是这样理解的，可以用50%甲醇过渡到10%甲醇长一点时间清洗你的使用了含缓冲盐流动相的的柱子。

补充一下，当然实验刚开始时，对色谱柱的平衡，可采用这个顺序过渡，50%甲醇过渡到10%甲醇 再过渡到你的含缓冲盐的B液，实际上就是一个缓慢逐渐缓冲的过程，不要突然的大比例的改变流动相，那样对系统，泵和色谱柱不友好。就是这个意思。

平衡时，一般每种流动相大概用多少体积啊？是以基线走稳为标准？