【讨论】梯度洗脱，一相为甲醇，一相为磷酸盐缓冲盐，使用时有什么注意事项

注意两相的互溶性，小心磷酸盐析出。

据说梯度的时候，最好用乙腈，尤其是在低波长处（<230nm）乙腈系统明显优于甲醇系统，由于甲醇的吸收特性，产生的背景吸收和因溶剂组成未按梯度改变而产生的基线漂移可能导致分析准确度和精密度下降

配制缓冲盐的水一定要干净啊

冲柱子的时候一定要注意流动相的置换，先用大比例的水冲洗掉缓冲盐，再用大比例的有机相洗，防止盐析出，堵塞色谱柱

冲柱子的时候一定要用20%甲醇冲洗最少1小时，然后用100%甲醇冲洗40分钟，用前一定要用20%甲醇过渡一下，不要直接放上流动相平衡柱子。