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【求助】毛细管电流过高问题

毛细管电泳(CE)

  • 我用毛细管电泳分离药物,用的缓冲体系为40mm硼砂,30mmSDS,20%乙腈,用的75微米内径管子,发现电流达到120微安。其他条件又分不开,并且还发现我重新配一瓶相同的缓冲,结果分离不如之前的好。这是为什么啊??有什么办法可以降低电流,分离能力又差不多。急!!!
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  • sunpengwjh

    第1楼2010/10/20

    实验允许的条件下,境地缓冲溶液浓度,降低电压!

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  • userwzy

    第2楼2010/10/20

    你能不能用50um的柱子试试,这样电流可以降低不小,而且一般小内径柱子分离可能效果不比大内径的差。

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  • userwzy

    第3楼2010/10/20

    还有为何重配的缓冲溶液效果不好呢,新配的电流和原来的有什么差别吗?总觉得你的电流有点高,这只是个人感觉。而且我也不常用75um的柱子,不知道电流多少合适。

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  • ericwong

    第4楼2010/10/20

    使用大内径的毛细管,对电流的影响比较大,毕竟电泳电流值与毛细管半径的平方成正比。
    和楼上的建议相同,使用50 um的毛细管。

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  • cpudaxiao

    第5楼2010/10/20

    120的电流又不高。更换缓冲液后分离效果改变很正常,所以建议条件稳定以后,一次不妨多配一些,比如500毫升。
    如果分离效果还可以不要更换其他仪器条件,建议

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  • cyljoa

    第6楼2010/10/20

    我尝试过降低硼砂浓度,但都不能分开。我测得是血浆样品,血浆里面的杂质干扰我的药物测定。

    sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:实验允许的条件下,境地缓冲溶液浓度,降低电压!

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  • cyljoa

    第7楼2010/10/20

    这点我也不大明白,可能是因为电流太高了,重现性就很差,所以,缓冲液有细微的变化就可能影响分离度。之前我做过一个实验,75微米管子一般30-60就差不多。

    userwzy(userwzy) 发表:还有为何重配的缓冲溶液效果不好呢,新配的电流和原来的有什么差别吗?总觉得你的电流有点高,这只是个人感觉。而且我也不常用75um的柱子,不知道电流多少合适。

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  • cyljoa

    第8楼2010/10/20

    我做的是激光诱导荧光检测器,如果换成50微米的管子,担心影响灵敏度。我又是做血液样品。所以听挺矛盾的。

    userwzy(userwzy) 发表:你能不能用50um的柱子试试,这样电流可以降低不小,而且一般小内径柱子分离可能效果不比大内径的差。

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  • cyljoa

    第9楼2010/10/20

    对啊,我就是之前摸好了这个条件,然后就配了个500ml的缓冲,结果一试,就发现分离的不如之前的好了。好郁闷。浪费了我好多乙腈啊!!!不知道是什么原因

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:120的电流又不高。更换缓冲液后分离效果改变很正常,所以建议条件稳定以后,一次不妨多配一些,比如500毫升。
    如果分离效果还可以不要更换其他仪器条件,建议

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  • cpudaxiao

    第10楼2010/10/21

    电泳的重现性本来就不好,重复多做几次就好了。

    cyljoa(cyljoa) 发表:对啊,我就是之前摸好了这个条件,然后就配了个500ml的缓冲,结果一试,就发现分离的不如之前的好了。好郁闷。浪费了我好多乙腈啊!!!不知道是什么原因

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