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【转帖】蛋白质纯化武器-设备篇(欢迎补充)
省部重点实验室
2010/11/01
私聊
生命科学仪器综合讨论
(1)超声波细胞破碎机
适用于5-100g湿菌体超声破碎,实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。
(2)高压匀浆机
大规模生产用,对菌体量无限制。破菌效果好,但要注意冷却。
(3)高分散乳化机
均匀悬浮菌体用,比搅拌快,均匀性好,特别适合于大规模生产。另外,大规模生产时缓冲液的配制很有用,可快速溶解、混匀。推荐品牌:IKA 国产品牌:FLUKO;
(4)中空纤维超滤柱
大规模生产时做菌体收集用,要配合大蠕动泵及压力表。
小规模研发时也有用做浓缩的,但感觉死体积比较大。
(5)高速冷冻离心机
小试、中试菌体收集用,破菌后离心,包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌:BECKMAN、日立、Eppendorf
(6)磁力搅拌器
就是搅拌用了。缓冲液配制,包涵体溶解等。推荐品牌:国产的都行,最好配4或6工位的。
(7)真空泵
离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌:Millipore WP61型。
(8)过滤器
同真空泵配合使用。推荐品牌:Sartorius烧结金属垫板的不锈钢50mm滤器。
(9)pH计
缓冲液配制、样品pH调节用。推荐品牌:梅特勒
(10)电导仪
就是测定缓冲液及样品的电导了,做离子交换层析有时候要用到。
(11)纯水仪
如果没有管道系统的纯水设备,那就必需要的了。至少也是要去离子水、双蒸水或三蒸水。推荐品牌:MINI Q
(12)紫外可见分光光度计
测定蛋白浓度。推荐品牌:Beckman,岛津
(13)核酸蛋白检测仪
纯化时在线监测。如果不是用AKTA、Bio-Rad之类的高级仪器,就必须要了。
(14)蠕动泵
简单纯化系统用、包涵体稀释复性。推荐品牌:兰格、GE公司P50。
(15)纯化系统
高级的纯化系统了。推荐品牌:AKTA explorer、AKTA Purifier。不推荐bio-rad的DUOFLOW。
(16)膜超滤器
蛋白样品浓缩、缓冲液置换、以及药品级蛋白纯化时缓冲液的去内毒素用。推荐品牌:Millipore Labscale、Pellicon(泵可用国产的兰格)
(17)蛋白电泳仪
SDS-PAGE、Westblot用。推荐品牌:Bio-Rad,国产上海天能。
(18)脱色摇床
电泳染色、脱色用。
(19)制冰机
破菌时冷却用。
(20)恒温培养箱
融合蛋白酶切去除tag时恒温用,做ELISA时用。
(21)凝胶成像仪
就是给电泳胶及WB拍照片用,要配照片打印机哦。就是一台数码相机,硬件各品牌没有本质差异,主要看那家的软件做的好,界面友好。
(22)电磁炉
加热电泳样品,方便,快捷。
(23)微波炉
电泳考染脱色。加热水,溶解尿素、硫酸铵等。
(24)微量取样器
就是枪了。从1ul到5ml都要的。还有一种电动的,可以用刻度吸管。推荐品牌:Gilson,eppendorf
(25)超净工作台
做蛋白样品的无菌过滤用。
(26)冰箱
不说了。
(27)电风扇
小量样品的浓缩风干。
个人感觉10-200ml的样品浓缩最为方便,比超滤、PEG等方法简单实用。
(28)电子天平
称重了。两种精度:0.1mg和0.01g。推荐品牌:梅特勒
(29)空调
这个我相信大家都不会反对,也是蛋白纯化对环境的要求。
(30)超声波清洗机
缓冲液脱气用,当然也可以采用真空泵抽真空的方法。特别是做疏水层析时,有机溶剂与水相混溶时脱气。
(31)酶标仪、洗板机
测定蛋白质免疫活性用。特别当我们纯化的蛋白原料含量很低时,SDS-PAGE无法有效监测就必须应用Elisa方法。
(32)恒温干燥箱、干烤箱
恒温干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗涤后的干燥,设定温度40-60度。
干烤箱用于干烤灭菌,内毒素去除等,设定温度180-220度。
(33)酸缸
就是做细胞培养常用的那种浸泡容器的东东,对药品级的蛋白纯化要求容器都要用酸缸泡过。
(34)UPS电源
保护层析设备,防止数据丢失,生产必备。
(35)层析冷柜 低温冷室
4度双门的那种大冷柜,可以把层析柱放进去,对温度敏感的蛋白纯化需要。
冷室作用同上,更彻底,只是运行费用更大。
(36)冷冻干燥机(器)
蛋白质保存较佳的方案。从手提式到药厂的大规模冻干室形式多样。
(37)不锈钢层析柱架、三叉夹
柱架有商品化的卖,但是没有自己DIY的好。可以自己设计好后找做不锈钢窗户的小店去做,很便宜。
夹层析柱的夹子首选三叉夹,很牢靠,最大可以夹50mm的GE夹套XK柱。
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版主-dong3626
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