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【第三届原创参赛】新柱柱效低原因调查分析

液相色谱(LC)

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    最近刚买了一根ODS 色谱柱,拿到新柱先看看产品说明书中有一张谱图其中有个组份是萘,用80%的甲醇水溶液作流动相,柱效为6万多。按照说明书我也准备了萘作标准物质,准备测一下新柱子的柱效,用纯甲醇作流动相(测试中偷了个懒,我认为只有萘一个组份应该没问题的)开始测试。一测试问题就来了:理论塔板数1355 萘标准品中杂质未分离出来;峰形很钝还拖尾。谱图如下图:

    开始怀疑是柱子有问题,不过这个厂家的柱子一直都挺好的,还是先不要下结论。把柱子卸下来装在另一台仪器上,流动相和仪器参数都一样,进相同的标准品,理论塔板数为9552,萘标准溶液中杂质分离出来。
    谱图如下:


    在另外一台仪器理论塔板数提高很多,说明色谱柱是没有问题的。仪器在换柱之前也没有出现异常问题。回想一下在用新柱子时,唯一动过的地方就是连接色谱柱的PEEK管有更好过,把两台仪器的PEEK管卸下来对比一下。问题出来了:原来更换的PEEK管内径比原来的大很多,对换过来再测试一下.理论塔板数为10307,萘标准品中杂质能完全分离出来,峰形很尖锐。


    如下图:



    分析影响理论塔板数的因素:
    1、理论塔板数(theoretical plate number,N---用于定量表示色谱柱的分离效率(简称柱效)。
    N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。
    2、柱外效应也是影响柱效的重要因素之一。柱外效应:简单的说色谱峰在柱外死空间里的扩展效应。(样品在流动相里是有扩散性的,无论在色谱柱里还是在管路里都是一样)柱外效应除了由不好的进样技术引起外;主要是由从进样点到检测池之间除柱子以外的所有死体积所引起。死体积
    通常测试中是包括了柱外死体积,即色谱仪中的管路和连接头间的空间以及进样系统和检测器的空间,包括柱后死体积和柱前死体积:
    A)柱后死体积如果太大就会造成已分离物的重新混合,使分离度降低峰形变差;
    B)柱前死体积太大造成样品分散过大,其效果类似于增加了上样体积,影响色谱柱的分离效果。
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  • 老多_小多

    第1楼2010/11/01

    楼主用的什么仪器,软件界面是黑的

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  • wjcst

    第2楼2010/11/02

    我用的是国产的高压液相系统,工作站里界面是可以设置的

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  • 肖筱

    第3楼2010/11/02

    看起来像分析之星的软件

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  • WHOEVER

    第4楼2010/11/02

    经常都会接到客户投诉液相色谱柱新柱测试不合格,各种品牌都有,拿回实验室测试,基本上99%以上都是好的。要是客户都像楼主这样就好了

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  • wdl158160

    第5楼2010/11/02

    很细心,不过我们一般都是直接做稳定的样品来测试柱效的

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  • dahua1981

    第6楼2010/11/02

    应助达人

    是不是柱子的质量问题啊

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  • ludytaa

    第7楼2010/11/03

    我用的Agilent 1100 界面也是黑色的啊

    老多_小多(emoc98311) 发表:楼主用的什么仪器,软件界面是黑的

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  • 初晶古恒

    第8楼2010/11/04

    现在做色谱柱的也越来越怪:

    以前的C18色谱柱测苯、萘等非极性不拖尾,测那些对硅羟基或金属有相互作用的有极性的化合物拖尾比较严重。

    现在的C18色谱柱测有极性的物质不怎么拖尾了,测苯、萘等非极性物质倒是容易拖尾了。

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  • dzh2188

    第9楼2010/11/06

    新柱用前还是先用甲醇低流速冲洗一下吧。

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  • isee

    第10楼2010/11/12

    有些理论知识,看过后,印象不深,只有结合实际问题,才能记得牢。

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