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【讨论】要做免疫球蛋白的非还原性SDS-PAGE

青林

2010/11/13

要做免疫球蛋白的非还原性SDS-PAGE，需要注意什么？
1、想用6%的分离胶，4.2%的浓缩胶，是否可以？
2、样品处理缓冲液，与通常的还原性上样缓冲液不一样的就是不加DTT或巯基乙醇，对吗？
3、电泳时的电压是否要小些，以减少产热，但长时间电泳，是否会破坏胶（6%已经很软了）？
4、现在我用的丙烯酰胺的C值为3%（0.9g双叉丙烯酰胺加29.1g丙烯酰胺）是否合适，特别是对于这种低交联度的凝胶是否合适，是否要修改C值？
5、将来染色时能否用热的染色液，或者在微波炉中加热？（我们现在12%或15%的胶是在热的染色液中染色的。）

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儒雅凤

第1楼2010/11/24

请参考：《要做免疫球蛋白的非还原性SDS-PAGE，有些事不明白。》
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20070618/879468/

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