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【第三届原创参赛】新手怎样操作Waters Alliance HPLC

juhong

2010/11/17

液相色谱（LC）

维权声明：本文为juhong原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。
公司最近有买Waters的液相，我们有制作自己的标准操作作业指导书，简单易懂，写上来与大家分享．

HPLC标准操作作业指导书

一、准备：

流动相：按方法要求配制流动相，经0.45mm微孔滤膜过滤，纯流动相超声波脱气10分钟以上。

样品溶液：按方法要求配制样品溶液，并以过滤或高速离心方式除去溶液中的固体微粒。

二：开机及平衡系统：

打开主机和检测器电源，待仪器界面出现Idle提示时，则表示仪器自检完成；

1.将2695泵清洗管路“Seal Wash in”（不透明管）和洗针管路（绿管）分别放入适当的溶剂中，按2695面板Diag键，进行以下操作：

1.1 管路排气操作：选择Prime SealWash，按Start键开始清洗，打开泵箱，检查泵入口处管路无气泡，则按Halt键暂停，按Close键回到上一界面。

1.2 洗针液管路排气操作：选择Prime NdlWash，按Start键，系统自动操作排气程序，自动完成操作后按Close键返回。按Exit键返回自检界面。

2.干燥管路的冲洗（长期不使用仪器时3-5天须做此项）

按屏幕右方Menu/Status键进入操作界面，按Direct Function键进入子菜单，选择Dry Prime项，逆时针打开两泵之间的黑色旋钮，插入注射器，点击OK键，选择Open A键，用注射器抽出约1ML液体，再同法操作B、C、D三条管路，完成后按Continue键，仪器自动进行

排液，排液结束后拧紧黑色旋钮。

3.系统排气、换液

按Direct Function键进入子菜单，按光标选择Wet Prime项，按OK键，设定流速和时间后按OK键完成排气操作。

4.注射器排气（注射器内无气泡时不需操作此项，但更换流动相时必须操作此项）

按Direct Function键进入子菜单，按光标选择Purge Injector项，按两次OK键，系统自动完成后屏幕上方显示Idle，保持Menu/Status界面。

以上4项为仪器硬件操作设定程序，在仪器分析样品前必须先操作以上步骤。

备注：

1. 洗针液配制：用实验中的有机相与水按实验中流动相的比例配置，水相比例可以略高一点，水相中不能含有盐类。

2. 清洗泵杆溶液：一般采用10%甲醇溶液，溶液有效期为15天左右。

三、HPLC 工作站的操作

1. 进入工作站以及创建文件夹

2.切换文件夹

在主菜单栏点击Manage项，在下拉菜单中点击Change Project/System…一栏，在弹出对话框中选择目标文件夹，点击OK键进入相应操作界面。

3.建立实验方法

在左侧命令栏中点击控制面板Control Panel按钮，在切换的界面左下方找到Lamp状态指示一栏，检查其对应小灯是否显示为绿色。若为绿色则表示检测器正常运行，点击命令栏中样品队列Sample Queue按钮返回原来的操作界面即可；若显示为黑色，则在此框中鼠标单击右键，在弹出菜单中选择Reset TUV进行校正；若在右击后小灯未恢复绿色或在检查时小灯为红色，则需要关闭检测器电源重启进行校正。检查正常后点击Sample Queue返回原来的操作界面。

监视区单击方法组编辑向导Invoke Method Set Editor Wizard

测；Dual:双波长检测），在Wavelength一栏设定实验检测波长， Sampling Rale 的参数一般设定为2 Points/Sec.

参数设置完成后在该界面主菜单栏点击File选项，在下拉菜单中选择Save as ...项，在弹出对话框中键入相应的名称，点击Save按钮保存方法，完成后退出该界面。在编辑界面点击Next进入下一步，再点击Next进入下一界面，点击Finish完成实验方法的创建和保存。

4.放置样品及设置序列

样品放置在转盘中，转盘有从A-E编码五个，每个可放置24个样品。转盘代号及颜色：

打开样品转盘门，在主机上选择所需样品转盘屏幕键定位样品转盘转台以便加载相应的样品转盘；将样品转盘加载入样品室后关闭样品转盘门。

在样品列表中填写Val（瓶号）Inj Vol(进样量)# of Inj(进样针数)Sample Name(样品名称)Function(功能，系统默认为Inject Sample)Method Set(方法)Run Time(运行时间)。点击主菜单栏File项，在下拉列表中选择Save as…，在弹出对话框中键入相应的列表名称，点击

附件：

HPLC标准操作作业指导书.doc

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该帖子已被版主-〓猪哥哥〓加6积分，加2经验;加分理由:感谢楼主分享

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〓疯子哥〓

第4楼2010/11/17

楼主的很多图片都看不了喔，楼主您再编辑添加下内容～
ＰＳ：您的内容不属于ＮＭＲ内容，我给您转移到液相版面

0

flyaway

第5楼2010/11/17

把用户名和密码都贴到网上了，我替楼主晕一下

0

〓猪哥哥〓

第6楼2010/11/17

楼主，这是自己原创的吗？
图片是要本地上传的，直接粘贴是显示不了的

0

juhong

第7楼2010/11/18

呵~出这样的一篇文章有几个人的功劳，但绝对是原创

0

精
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lj-1987

第8楼2010/11/18

没有图片啊

0

〓猪哥哥〓

第9楼2010/11/18

好的，你把文中的图片重新上传一下吧。如果你不知道怎么上传，就直接传一个word吧
juhong(juhong) 发表:呵~出这样的一篇文章有几个人的功劳，但绝对是原创

0

阿宝

第10楼2010/11/18

图片都是小红×，请确认

0

juhong

第11楼2010/11/18

猪哥哥，上传喽~

0

sc360xp

第12楼2010/11/19

LZ请说一下全套仪器的配置。文档下来看了，有图，谢谢。

0

bolin85ppm

第13楼2010/12/04

弄的很好很详细啊，就是图片显示不出

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