【求助】【求助】液相色谱 测定物质问题？

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反相高效液相色谱法测定小鼠中脑内D天冬氨酸和D谷氨酸
【摘要】 建立了测定生物样品中微量D天冬氨酸、D谷氨酸的高效液相色谱法。以邻苯二甲醛（OPA）Ｎ异丁酰基L半胱氨酸柱前衍生氨基酸对映体，醋酸钠甲醇乙腈混合液为流动相，在Shimpack VPODS柱上，采用梯度淋洗技术，2种氨基酸对映体在40 min内完全分离。以荧光检测，D天冬氨酸（DAsp）、D谷氨酸（DGlu）的浓度在1.0×10-8～1.0×10-6 mol/L时，其浓度与峰面积呈良好的线性关系。当信噪比为3（S/N=3）时，DAsp和DGlu的检出限分别为2.0×10-9 mol/L和1.0 ×10-9 mol/L。将方法运用于帕金森模型小鼠中脑中DAsp和DGlu含量的测定，对照组与模型组中脑DAsp含量无显著性差异，DGlu 含量呈现显著性差异。推测在脑组织里，内源性的DAsp的合成及转运不受神经毒素1甲基4苯基1，2，3，6四氢吡啶(MTPT)的毒害仍保持原有的动态平衡；而DGlu可能具备与L型对映体相似的兴奋毒性，参与帕金森疾病的发病机制。