仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【第三届原创参赛】枳葛保肝颗粒中葛花和枳椇子提取工艺及含量测定的研究

中药/天然药检测

  • 维权声明:本文为19861005原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。

    枳葛保肝颗粒中葛花和枳椇子提取工艺及含量测定的研究



    一、实验目的

    酒精中毒问题已成为严重的社会问题,过度的饮酒,则会引起慢性乙醇中毒、心肌乏力,肾功能衰竭等症状,对人体消化、神经、循环等系统造成严重损害,还会损脏腑、耗气血,严重危害人体健康葛花和枳椇子是中国传统医学中最具代表性的解酒药物。对急性酒精性肝损伤具有保护作用。研究葛花和枳椇子的最佳提取工艺,测定葛花中鸢尾苷和枳椇子中槲皮素的含量




    二、实验部分


    1 葛花提取工艺及含量测定的研究。

    Ⅰ高效液相法测定葛花中鸢尾苷的含量

    色谱条件:

    色谱柱:DiamosilC18(2)5μm150×4.6mm);

    柱温:室温;

    流动相:乙腈:水(2080);

    波长:265nm

    流速:1.0ml/min

    进样量为20μl

    分离度大于1.5

    理论塔板数按鸢尾苷峰计算,大于2000

    线性关系的考察

    分别吸取6个浓度(1.1μɡ/mL2.2μɡ/mL4.4μɡ/mL8.8μɡ/mL22μɡ/mL33μɡ/mL)的对照品溶液20μL,在上述色谱条件下分别进样,测定峰面积。以峰面积Y(千伏)为纵坐标,对照品浓度X(μɡ/mL)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程:Y=0.1781X-0.0056 R =0.9999,实验结果表明鸢尾苷在1.1μɡ/mL~33μɡ/mL范围内线性关系良好。(见图)




    精密度实验:取同一对照品溶液,重复进样5次,测定精密度。峰面积的RSD 1.3%n=5)。表明精密度良好。
    稳定性实验:取同一样品溶液,在024812h分别按上述色谱条件进样,测得峰面积的 RSD 2.47%n=5)。结果表明,供试品溶液在12小时内稳定。
    加样回收率实验:精密称取已知鸢尾苷含量的葛花提取物(4.015%)六份,分别精密加入一定浓度的鸢尾苷对照品适量,用甲醇超声溶解,并定容于10ml容量瓶中,过滤。分别进样,根据峰面积计算含量,计算加样回收率的RSD2.0%n=6)。表明准确度良好。
    含量测定:分别吸取对照品溶液和样品溶液各20μl,进样,色谱图如下(上:对照品;下:样品溶液)



    Ⅱ葛花提取工艺的研究

    葛花的正交设计试验



    由表中可知,A1B1C2为最佳方案。即40%乙醇溶液提取两次,第一次14倍量提取1.5h、第二次12倍量提取1.0小时



    2、枳椇子提取工艺及含量测定的研究

    Ⅰ高效液相法测定枳椇子中槲皮素的含量

    色谱条件

    色谱柱:Platisil(铂金)ODS(5μm,250×4.6mm);

    柱温:室温;

    流动相:乙腈:水(4060)用0.4%的磷酸调PH=4.1

    波长:360nm

    流速:1.0ml/min

    进样量为20μl

    槲皮素相邻峰分离度>1.5

    理论塔板数以槲皮素计算,应不得低于2000

    线性关系的考察:分别吸取5个浓度(2.5μg/ml5.0 μg/ml 10μg/ml 25μg/ml 40μg/ml 50μg/ml )的对照品溶液20μL,在上述色谱条件下分别进样,测定峰面积。以峰面积Y(千伏)为纵坐标,对照品浓度X(μg/ml)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程:Y=0.1243X-0.1542 R=0.9998

    实验结果表明槲皮素在2.5μg/ml~50μg/ml范围内线性关系良好。(见图)




    精密度实验:精密量取同一对照品溶液 20μl,重复进样,测定精密度。结果RSD 2.14%n=5)。表明精密度良好。

    稳定性实验:取同一样品溶液,在024812h分别按上述色谱条件进样,测得峰面积的 RSD 2.25%n=5)。结果表明,供试品溶液在12小时内稳定。

    加样回收率实验:精密称定已知槲皮素含量(0.4%)的枳椇子提取物9份,分别精密加入高、中、低浓度槲皮素对照品适量,每一浓度3份。用甲醇定容于10ml容量瓶中。用0.45μm微孔滤膜过滤,得供试品溶液。依法测定。计算加样回收率的RSD2.6%n=9)。表明准确度良好。

    含量测定:分别吸取对照品和样品溶液各20μl,进样,色谱图如下(上:对照品;下:样品)




    枳椇子提取工艺的研究



    枳椇子的正交设计试验

    因素水平表

    水平A提取时间(hB乙醇浓度(%C乙醇用量(倍)
    11.0308
    21.55010
    32.07012





    由表中可知,A2B2C3为最佳方案。即加入12倍量的50%乙醇溶液提取1.5h



    本实验以鸢尾苷为指标,通过正交试验法优选葛花的最佳提取工艺为:药材加40%乙醇溶液提取两次,第一次14倍量提取1.5h、第二次12倍量提取1.0小时。

    以槲皮素为指标,通过正交试验法优选枳椇子的最佳提取工艺为:药材加12倍量的50%乙醇溶液提取1.5h

    在参考有关文献的基础上,经多次实验,摸索出了文中的色谱条件,在该条件下,待测成分与相邻峰达到了基线分离,且峰型较好,且具有较好的重现性,可分别用于葛花和枳椇子的含量测定。
  • 该帖子已被管理者-设置为精华,下面是奖励记录:加20积分,加5声望
    +关注 私聊
  • yuduoling

    第1楼2010/12/06

    支持原创,投你一票了。

0
    +关注 私聊
  • 冷冷的冰雨

    第2楼2010/12/06

    写的不错!! 以后常来交流

0
    +关注 私聊
  • 冷冷的冰雨

    第3楼2010/12/06

    楼主可以整理一下,投期刊

0
    +关注 私聊
  • 第4楼2010/12/06

    槲皮素那边进样量减少点,峰型应该会更好看一点,或者稀释下浓度,峰有点拖尾

0
    +关注 私聊
  • 19861005

    第5楼2010/12/06

    嗯,这个以后改善一下

0
    +关注 私聊
  • 阿三

    第6楼2010/12/13

    柱效不是很高吧 呵呵

0
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...