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【求助】求 土壤多酚氧化酶测定方法,我已有,但是看不懂,求高手解释

土壤固体废弃物监测

  • 试剂配制
    (1)1%邻苯三酚溶液
    (2)乙醚。
    (3)0.5N盐酸。
    (4)重铬酸钾标准溶液——o.75g重铬酸钾溶于1升0.5N
    HCl(相当于50mI醚中含5mg紫色没食子素)。
    (5)pH4.5柠檬酸——磷酸缓冲液。
    标收曲线绘制:取重铬酸钾标准溶液,用o.5N HCI稀释成
    各种不同浓度。定容后,在分光光度计上于430nm处比色测定。
    以光密度位为纵坐标,以浓度为横坐标绘制标准曲线。
    2。投作步骤 取1g土样(过o.25mm筛),置于50ml三角
    瓶中,然后注入10ml 1%邻苯三酚溶液,将瓶内含物摇荡后放
    在30度恒温掐小培养2h。取出后加4mlpH 4.5柠檬酸——磷酸
    缓冲液,再加35ml乙醚,用力摇荡数次,萃取30min。最后,
    将含溶解的紫色没食子素的着色乙醚相进行比色。比色时用波长
    为430nm的滤光片。为防止因乙醚引起的误差,每比色一次用
    元水乙醇洗涤比色液槽一次。
    为了消除土壤中原有的醚溶性有机物质而引起的误差及校正
    没食于酚的纯度,需设无基质的土壤和无土壤的基质作对照。在
    无基质的土壤的对照中,用水代替基质进行培养。
    3.活性表示 紫色没食子索的量,根据用重铬酸钾绘制的标准曲线查知。
    多酚氧化的活性,以2h后1g土壤中紫色没食子素的毫克
    数表示。

    方法如上所述

    请问:

    1,重铬酸钾的标准曲线如何绘制,分别取那些浓度?
    2,怎样用乙醚萃取?
    3,最后的计算公式是什么?
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  • 天涯就是天地

    第1楼2010/12/08

    1、重铬酸钾曲线浓度的配制要根据样品的含量怎么样。
    2、乙醚的萃取方法说得很明白,按照做就行。
    3、这份资料应该有公式的吧。

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  • rewarden

    第2楼2010/12/09

    1、标准曲线如果不知道做多大的话就尽量多做几个,梯度放大点,最大值最好大点,然后做个预实验,看看大概范围,最后敲定。
    2、乙醚萃取貌似很清楚啊,就是混合一起摇就行,最后把乙醚吸出来。
    3、公式就是你通过标准曲线查出浓度,然后浓度*30/1单位应该是你重铬酸钾标准浓度的单位。

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  • 天涯就是天地

    第3楼2010/12/09

    回答的很到位

    rewarden(rewarden) 发表:1、标准曲线如果不知道做多大的话就尽量多做几个,梯度放大点,最大值最好大点,然后做个预实验,看看大概范围,最后敲定。
    2、乙醚萃取貌似很清楚啊,就是混合一起摇就行,最后把乙醚吸出来。
    3、公式就是你通过标准曲线查出浓度,然后浓度*30/1单位应该是你重铬酸钾标准浓度的单位。

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  • heben818

    第4楼2010/12/15

    操作步骤中说要萃取30分钟,请问你们用的是多大的分液漏斗呢?

    之后这个乙醚萃取液是直接放在分光光度计上比色吗,跟他对比的空白放乙醚还是放别的呢?

    另外,你们有没有做过纤维素酶呢?用的是新鲜土还是风干土?用的是那种比色法呢?

    非常感谢啊

    天涯就是天地(tianyamzn) 发表:1、重铬酸钾曲线浓度的配制要根据样品的含量怎么样。
    2、乙醚的萃取方法说得很明白,按照做就行。
    3、这份资料应该有公式的吧。

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  • 天涯就是天地

    第5楼2010/12/20

    纤维酶没做过。

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  • lily502

    第6楼2011/01/03

    土壤酶好做吗??

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  • 环保志士

    第7楼2011/01/05

    分明是理解上有问题,不是看不懂吧

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  • Insm_4a6b96bc

    第8楼2019/04/22

    重铬酸钾为什么要用盐酸溶解

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