【求助】蛋黄卵磷脂2010药典检测方法（ELSD）

应助达人

   
【含量测定】 　　
    磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺 照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录ⅤD）测定。 　
    色谱条件与系统适应性试验 用硅胶为填充剂（色谱柱Alltima Sillica，250mm×4.6mm×5μm），柱温为40℃；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（85:15:0.45:0.05，v/v）为流动相A，以正己烷-异丙醇-流动相A（20:48:32，v/v）为流动相B；流速为每分钟1ml，按下表进行梯度洗脱；检测器为蒸发光散射检测器（参考条件：漂移管温度为72℃；载气流量为每分钟2.0ml）。 　　
    取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、鞘磷脂、溶血磷脂酰胆碱对照品各适量，用三氯甲烷-甲醇（2:1）溶解制成每1ml含上述对照品分别为50μg、100μg、100μg、200μg、200μg、200μg的混合溶液，取上述溶液20μl注入液相色谱仪，各成分按上述顺序依次洗脱，各成分分离度应符合规定，理论板数按磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺峰计算应不低于1500。 　　
    标准曲线的制备 称取磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱对照品适量，精密称定，用三氯甲烷-甲醇（2:1）溶解，稀释制成每1ml含磷脂酰胆碱50、100、150、200、300、400μg，含磷脂酰乙醇胺5、10、15、20、30、40μg 的溶液作为对照溶液。精密量取上述对照溶液各20μl注入液相色谱仪中，以浓度的对数值为横坐标，峰面积的对数值为纵坐标计算回归方程。 　　
    供试品溶液的制备 取本品约15mg，精密称定，置50ml量瓶中，加三氯甲烷-甲醇（2:1）溶解并稀释至刻度。 　　
    测定方法 取供试溶液20μl注入液相色谱仪中，记录色谱图，由回归方程计算磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺的含量。含磷脂酰胆碱应大于72.0%，含磷脂酰乙醇胺应不得过10.0%。

应助达人

这个方法很难做吗，楼主在检测过程中遇到了什么问题？

主要是线性有6个点，最低浓度那个点基本上就是检测限了！

线性不难做吧，进样质量和峰面积都取对数后线性是没问题的，上海通微的UM3000检测器就可以了啊

朋友，你有没有按照药典方法做出的蛋黄卵磷脂含量色谱图，需要六种物质的，谢谢！发一张看看。