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【求助】液相每一针都有两个小峰,求助解决方法

  • ianzeng177
    2011/03/05
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 开始用的是C8柱,色谱条件用的是乙腈和缓冲盐,进对照的时候发现3,4分钟处有两个小峰,之前做的时候都没有。
    后来换了一个品种,C18柱,色谱条件用的是甲醇和另一种缓冲液,结果发现在同样保留时间处仍有两个小峰。

    请问这个可能是什么问题?解决方法如何?
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  • 知足常乐!

    第1楼2011/03/05

    做空白试验什么情况?

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  • fengmo4668

    第2楼2011/03/05

    做样的峰面积和以前相比小吗?

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  • ianzeng177

    第3楼2011/03/06

    用样品的稀释液做也有这两个小峰,乙腈做的峰不是很明显。
    重新开的一瓶对照品也有这两个小峰。都是在4分钟一前一后两个峰。
    样品峰的面积有没有变化不好说,因为换了一个新的保护柱,有点差别也正常。

    纯乙腈的图:

    柱后接的流动相再次进样

    换C18柱,换色谱条件,另外一个品种的对照瓶峰

    知足常乐!(wenshaowei-2008) 发表:做空白试验什么情况?

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  • wpsxyf

    第4楼2011/03/07

    反复注射,如峰面积不变,那就是杂质.峰面积变小,可能是系统污染.

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  • linliu5795

    第6楼2011/03/08

    做空白试验试试

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  • ianzeng177

    第7楼2011/03/09

    打电话给Agilent的工程师,他让做空瓶试验,即放置空瓶,进样0ul,看是否还有这两个峰。
    结果还有,他怀疑是转子密封垫磨损或毁坏。我拆下转子密封垫查看,没有明显的磨损痕迹,用甲醇超声后原样装回。
    再次进样、流动相、空白,还是有这两个小峰。

    现在可以肯定的是系统污染,但是是哪一部分污染还有待商榷。
    现在有点怀疑是针座污染,因为我们一直没有用洗针进样(有老师说洗针进样更容易污染)。针座应该如何清洗呢?

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  • laobie

    第8楼2011/03/11

    走基线有这两个小峰吗?

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  • 机枪射手

    第9楼2011/03/11

    多进几针看看变化在判断

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  • lxjwinall

    第10楼2011/03/11

    先把针坐清洗,再不行,拿掉柱子,用IPA冲洗系统

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