【讨论】色谱分析时点样有哪些注意事项

应助达人

注意事项
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用液相色谱进行分析时，即使装置无故障，有时也会无法做出准确的分析。分析前作好检查工作，可防患于未然。为此，将平时须留意的事项，做简要介绍。


一、启动前的检查


1
流动相的置备要与装置相适应
流动相必须经过过滤：在送液泵内，为了防止杂质和颗粒进入流路，要装有0.45μm的吸滤器，否则会导致流路和污染，使仪器工作不正常。
1)
流动相恢复到室温后使用：流动相温度与室温相差时，容易产生气泡。导致仪器基线很难稳定，特别是发生漂移，使流动相要恢复到室温后再使用。
2)
流动相务必进行脱气：使用液相色谱仪时遇到的最大麻烦就是流动相产生气泡，这会引起泵输液不畅和检测器产生噪声和漂移。
3)
检查溶剂瓶内吸滤器是否堵塞：溶剂的质量或微生物的生长会堵塞吸滤器，从而影响液相色谱系统的正常运行。有效防止吸滤器堵塞的有效方法：a.若需使用含盐的流动相，使用前务必过滤；b.流动相若为蒸馏水或含盐的缓冲液，建议现用现配；c.尽量避免溶剂瓶在阳光下暴晒。吸滤器堵塞后的处理方法：a.取下吸滤器滤头放在(1:4,V/V)硝酸溶液烧杯中超声清洗15min；b.取出后用蒸馏水超声清洗10min；c.用吸耳球吹出过滤头中的液体；d.再换蒸馏水超声清洗10min；e.用吸耳球吹出过滤头中的水分；将吸滤器滤头重新放入熔剂瓶中(正相系统注意将吸滤器滤头烘干在使用)。
4)
更换流动相时应注意事项：
a)
更换有互溶性的流动相时：a.将吸滤器部分放入准备更换流动相的烧杯中边振动边清洗，更换烧杯中的流动相直至清洗干净；b.打开排液阀，按清洗键清洗泵中的流动相；c.然后将吸滤器部分再放入流动相瓶内，关闭排液阀，在较短时间内清洗流路；d.最后连接柱和检测器，清洗整个分析流路。
b)
更换无互溶性的流动相时：准备与新旧流动相具有互溶性的中间清洗液，首先换成中间清洗液，然后再把中间清洗液换成新的流动相.每次更换顺序都要遵循前诉的a～d的顺序。
c)
更换缓冲液的流动相时：在新旧流动相的任一方或双方使用缓冲液时，准备蒸馏水做中间清洗液，首先用蒸馏水置换整个流路，然后更换成新的流动相，这是防止缓冲液中的盐析出。

2
输液泵
1)
如果进液管内不进液时，使用注射器吸液：发现进液管内不进液或有大气泡时，打开排液阀，用用注射器从排液管中吸液。若空气量太大时，有时用泵的清洗功能也无法彻底清除空气。
2)
通常在输液前进行流动相的清洗：例如，停机夜间的温度与白天相差大时，或几天未开机时，有时在泵头内会产生气泡。如果不清除就输液时，会由于气泡不能脱出造成输液不畅，因此，需进行5分钟清洗，排除气泡。
3
六通阀
1)
样品溶液进样前必须用0.45μm滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。
2)
转动阀芯时不能太慢，更不能停留在中间位置，否则流动相受阻，使泵内压力剧增，甚至超过泵的最大压力，再转到进样位时，过高的压力将使柱头损坏。
3)
为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。
4
自动进样器
1)
确认清洗液：自动进样器的清洗液，请使用与流动相同的液体。但是含盐分时必须把盐分清除。另外，清洗液在6通阀内与流动相接通，这时须注意盐分不要析出（盐的析出是造成堵塞的原因）。
2)
清洗液脱气：自动进样器的清洗液，也是封入在样品计量部分的溶剂。在连续运转时会产生气泡导致误差，必须使用脱气装置进行脱气。
3)
必须净化清洗液：例如，停机夜间的室温与白天相差较大时，或几天未开机时，清洗液的流路中会产生气泡，不除去气泡就进行分析时，进样量会产生偏差，因此在等待基线稳定的期间内，进行清洗，排出气泡。用吸液器从排液器彻底吸引（起动注水）后，关闭排液，进行清洗。