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【求助】uplc-ms-ms 进行多肽定性分析

  • catty125699
    2011/03/16
    • 私聊

液质联用（LCMS）

  • 最近在用uplc-三重四极杆质谱（waters TQD）分析多肽样品分子量，分子量从900-6000不等，生产中间体

    谱蠕动泵进样，纯水0.1%甲酸溶解，一级质谱全扫描：
    1有时没有目标分子峰出现（一级锥孔电压50并不大）这个问题实在令人费解
    2分子量2000以上应带多电荷，但很少见2+的峰出现，而我们有时候很需要这个峰定性
    请问一般做多肽一级质谱都用什么试剂溶解，加何种酸才能使信号响应良好

    有做过多肽样品质谱分析的前辈请指教，非常感谢
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  • maldiguy

    第1楼2011/03/17

    分子量2000以上基本上是3价的
    是不是样品里面盐比较多？一般直接进样应该很好出峰的

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  • catty125699

    第2楼2011/03/21

    样品里应该没有盐的，不过是有其他小的杂肽

    maldiguy(maldiguy) 发表:分子量2000以上基本上是3价的
    是不是样品里面盐比较多？一般直接进样应该很好出峰的

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  • nike123

    第3楼2011/03/21

    问沃特斯的技术支持呀！问题会很快解决的呀。

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  • 蓝精灵

    第4楼2011/03/23

    以前有做过小肽，貌似对样品溶剂和流动相溶剂的pH要求较高，楼主可以试一试

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  • catty125699

    第5楼2011/03/24

    好的，谢谢提醒

    蓝精灵(xuxue_19861016) 发表:以前有做过小肽，貌似对样品溶剂和流动相溶剂的pH要求较高，楼主可以试一试

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  • tanggangfeng

    第6楼2011/03/26

    直接进样，一般在样品直接加甲酸比较的多。

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  • catty125699

    第7楼2011/03/29

    感谢各位的帮助，现在这个问题已经解决了，找工程师清洗了仪器，从新做了校正

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  • junjun203

    第8楼2011/04/01

    加些有机相估计信号会更好

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  • vnaren

    第9楼2011/04/07

    1。直接进样建议还是使用含50%有机溶剂的流动相利于离子化
    2。2000的肽可以看一下+3的离子
    3。不知道你样品是混合物还是纯品，建议有条件还是经过柱子分离后LCMS分析效果比较好

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