仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【求助】RP-HPLC 荧光检测器图谱问题

液相色谱(LC)

  • 最近使用RP-HPLC 荧光检测器的时后出现了以下的图谱:

    mobile phase使用ACN:THF:H2O=90:4:10 Column为supelco C18(4.6mm × 250mm,5μm) λex为260nmλem315nm
    使用前皆有先将荧光检测器预热30min,进样两次mobile phase皆没有问题,第三次出现上述不正常图谱.
    此方法使用两三个月都没有问题,最近才出现此问题,且时好时坏,有时后正常有时后不正常!
    想请问一下有可能是荧光检测器出现问题?氙灯寿命快到了没有能量了吗?
    或者是Column的问题? 寿命将至,太脏了?
    先感谢各位前辈们!!!
    +关注 私聊
  • 有水有渝

    第1楼2011/03/21

    应助达人

    泵的压力与以前相比有没有异常?氙灯寿命你可以检查一下能量就知道了。

0
    +关注 私聊
  • ohwey

    第2楼2011/03/21

    压力正常没有任何异常高压低压,压力也没有起伏的变化,皆在1000psi左右
    能量要如何检查?我使用的是HITACHI L-7480 FL Detector
    机台很久了且找不到说明书...
    还请前辈们指教一下!谢谢

0
    +关注 私聊
  • ohwey

    第3楼2011/03/21

    在仪器上已经看到能量了
    能量显示为 131 !
    这代表还是可用还是???
    麻烦解答,谢谢!

0
    +关注 私聊
  • 双面娃娃

    第4楼2011/03/21

    氙灯使用寿命一般为500小时,可以查看一下使用时间吧。如果超过时间过长的话,可能造成测定不稳定的情况。131应该是131%,也就是说氙灯的使用时间超过设置时间的31%。已使用655小时了。不知道对不对,仅做参考。

0
    +关注 私聊
  • ohwey

    第5楼2011/03/24

    最后问题解决了!!!
    不是荧光检测器的问题,荧光检测器很正常!
    而是Column太脏了!寿命也差不多了!
    mobile phase用到92%ACN,sample要25min才出峰
    分析的是血浆内的Colistin抗生素药物!
    不知道前辈们对于这样的sample有没有用哪一种方法清洗Column会比较理想?

0
    +关注 私聊
  • linlin6

    第7楼2011/03/25

    色谱柱太脏会导致荧光信号突然变化?

0
    +关注 私聊
  • ohwey

    第8楼2011/03/25

    对于这方面我也觉得很疑惑,请工程师来检修,他说若是Xe灯有问题,不亮就是不亮,不会时好时坏,有时可以分析到样品有时不行,主要是cell池脏了或column脏了,在实验时将留在column内的杂直冲出来,我所分析的样品是一复杂的混合物,内含有高极性亦有非极性之样品,在清洗column方面也较困难,工程师是建议,使用100%MeOH,异丙醇,2~5%硝酸清洗,但对Column相对也会减少其寿命.

    这是工程师告诉我的,对于入门的我来说只能相信专业!
    虽然他这么说不知道是不是要推销我购买Column,但目前为止没有更换Xe灯的情况下,将Column与机台清洗后目前检测皆是正常的!

    不知道前辈们有没有其他意见指教!先谢谢了!

0
    +关注 私聊
  • 1818

    第9楼2011/03/25

    估计是平衡时间不够!!

0
    +关注 私聊
  • qiuxingwei

    第10楼2011/03/27

    荧光时间是怎么计算的

0
    +关注 私聊
  • 老多_小多

    第11楼2011/03/28

    工程师说的也有道理,并不是没可能

0
查看更多
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...