【原创】“假鸡蛋”成分分析-环丙烯脂肪酸GC-MS分析

楼主钻研的精神可嘉。

楼主能不能分享一下检测结果

期待楼主的结果

应助达人

楼主能不能讲讲GB 5413.27-2010第二法大致是怎样检测？也期望更详细的检测过程和结果。

对啊,把检测过程及结果贴上来给我们分享

第二法 氨水—乙醇提取法
10 原理
乳与乳制品中的脂肪经皂化处理后生成游离脂肪酸，在三氟化硼催化下进行甲酯化反应，经甲酯
化后的脂肪酸通过气相色谱柱分离，以氢火焰离子化检测器检测，外标法定量。
11 试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682规定的一级水。
11.1 甲醇：色谱纯。
11.2 乙醚。
11.3 石油醚：沸程30 ℃～60 ℃。
11.4 乙醇（体积分数≥95 %）。
11.5 氨水（体积分数为25 %）。
11.6 正己烷（C6H14）：色谱纯。
11.7 高峰氏淀粉酶（Taka-Diastase）：128 U/mg。
11.8 三氟化硼甲醇溶液（质量分数为14 %）。
11.9 饱和氯化钠溶液：溶解360 g 氯化钠于1.0 L 水中，搅拌溶解，澄清备用。
11.10 氢氧化钾甲醇溶液（0.5 mol/L）：称取2.8 g 氢氧化钾，用甲醇（11.1）溶解，并稀释定容至
100 mL，混匀。
11.11 焦性没食子酸甲醇溶液（10 %）：将1.0 g 焦性没食子酸溶于10 mL 甲醇中配制成10 %焦性
没食子酸甲醇溶液备用。
11.12 脂肪酸甲酯标准物质：纯度≥99 %，贮存于－10 ℃以下的冰箱中，脂肪酸种类参见附录A 中
的表A.1。
11.13 脂肪酸甲酯标准工作溶液： 按试样中各脂肪酸含量及所要分析脂肪酸的种类适当配制其浓度，
正己烷定容并贮存于－10 ℃以下的冰箱中，有效期三个月。
12 仪器和设备
12.1 天平：感量为0.1 mg。
12.2 抽脂管：100 mL 磨口具塞试管，抽脂管干燥、恒重。
12.3 旋转蒸发仪。
12.4 离心机：转速≥5000 转/分钟。
12.5 恒温水浴锅。
12.6 气相色谱仪，带FID 检测器。
13 分析步骤
13.1 试样制备
预先将需冷藏的试样从冰箱中取出，放至室温。
13.1.1 液态试样
称取10 g（精确到0.1 mg）试样于抽脂管中，待测。
13.1.2 固态试样
13.1.2.1 含淀粉试样
称取试样1.0 g（精确到0.1 mg）至抽脂管中（12.2），加入0.1 g 高峰氏淀粉酶（11.7），加入
10 mL 45 ℃～50 ℃的水，混合均匀后，用氮气排除瓶中空气，盖上瓶塞，置45 ℃ ±1 ℃烘箱内30 min，
取出。
13.1.2.2 不含淀粉试样
称取试样1.0 g（精确到0.1 mg）至抽脂管（12.2）中，加入65 ℃ ±1 ℃的水10 mL 溶解试样，振
摇，使样品完全分散。
于上述试样（13.1.1和13.1.2）中加入2 mL氨水（11.5），于65 ℃ ±1 ℃水浴锅中放置15 min，取出
轻摇，冷至室温。
13.1.3 无水奶油
称取试样0.2 g（精确到0.1 mg）于磨口烧瓶中，按13.3所述进行皂化酯化。
13.2 脂肪提取
在制备好的样品中加入10 mL乙醇（11.4），混匀。加入25 mL乙醚（11.2），加塞振摇1 min。加
入25 mL石油醚（11.3），加塞振摇1 min，静置、分层，有机层转入磨口烧瓶中。再加入25 mL乙醚（11.2）
及25 mL石油醚（11.3），加塞振摇1 min，静置、分层，有机层转入磨口烧瓶中，再重复操作一次。
合并抽提液于磨口烧瓶中，用旋转蒸发仪浓缩至干。
13.3 皂化酯化
在浓缩物（13.2）或无水奶油（13.1.3）中加入1.0 mL焦性没食子酸甲醇溶液（11.11）。浓缩干燥
之后再加入10 mL氢氧化钾甲醇溶液（11.10）置于80 ℃ ±1 ℃水浴上回流5 min～10 min。再加入5 mL
三氟化硼甲醇溶液（11.8），继续回流15 min，冷却至室温，将烧瓶中的液体移入50 mL离心管中，分
别用3 mL饱和氯化钠溶液（11.9）清洗烧瓶三次，合并饱和氯化钠溶液于50 mL离心管，加入10 mL正
己烷（11.6），振摇后，以5000 转/分钟离心5 min，取上清液作为试液，供气相色谱仪（12.6）测定。
注：三氟化硼甲醇溶液为强腐蚀性试剂，使用时应注意防护。
13.4 色谱参考条件
色谱柱：固定液100 %二氰丙基聚硅氧烷，100 m ×0.25 mm，0.20 μm，或性能相当的色谱柱。
载气：氮气。
载气流速：1.0 mL/min。
进样口温度：260 ℃。
分流比：30：1。
检测器温度：280 ℃。
柱温箱温度：初始温度140 ℃，保持5 min，以4 ℃/min升温至240 ℃，保持15 min。
进样量：1.0 μL。
13.5 测定
分别准确吸取1.0 μL脂肪酸甲酯标准工作溶液（11.13）及试液（13.3）注入色谱仪，平行测定次
数不少于两次，以色谱峰峰面积定量。
不知道楼主的样品是选择哪种处理方式，是否有需要改进的地方？

就是这一方法，只不过我没有100 %二氰丙基聚硅氧烷柱，用的是DB-5ms柱，那柱太贵，要1万多。

应助达人

楼主最好详细讲讲整个过程

应助达人

请问DB-5ms柱的分离效果如何？分享一下您的实验和结果？