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【求助】吸光度为负值,怎么办?

紫外可见分光光度计(UV)

  • 因科研需要,最近在用可见光分光光度法测尿素的含量。以对二氨基苯甲醛为显色剂,420nm为测量波长,已用尿素标液作出了标准曲线。现在用标准曲线测某溶液中尿素的含量,可测量时吸光度为负值?什么原因造成的?如何解决?
    谢谢!
    焦急等待中!
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  • 夕阳

    第1楼2011/03/26

    应助达人

    未做基线校正或空白扣除。此外你的样品的吸光值要比空白溶液的浓度还要低。

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  • jbz1124

    第2楼2011/03/26

    可是待测溶液的颜色要比空白溶液的颜色要深呀?
    怎么回事?

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  • 天天洗碗

    第3楼2011/03/26

    样品的吸光值要比空白溶液的浓度还要低

    这种情况是何原因引起的?

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  • abcdefghijkl123

    第4楼2011/03/27

    是不是因为你的样液中有产生负干扰的物质啊

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  • 夕阳

    第5楼2011/03/27

    应助达人

    请楼主将标样用的空白溶液的吸光值及测试的样品的吸光值传上来,这样问题便一目了然了。

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  • jbz1124

    第6楼2011/03/27

    空白溶液的透光度由18.7%调整为T%=100;
    尿素样品的吸光度A=-0.113

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  • 夕阳

    第7楼2011/03/27

    应助达人

    楼主的测量方法有两个问题:
    (1)空白溶液用透过率表示,而样品用吸光度表示。尽管100%的吸光值是0ABS,但是这样做比较你不感到别扭吗?
    (2)由于楼主事先已经将空白扣除了零,所以即使空白溶液的吸光值比样品的高,现在也看不出来了。所以,样品用曲线的回归方法得出的吸光值为负值了。
    正确的判断方法:
    (1)波长设定为425nm,测量方式设定为吸光度。
    (2)样品室内任和物品不放,调零,此时,仪器的吸光度为0。
    (3)将空白样品放到样品池架内,记录下吸光值。
    (4)将样品放到样品池架内,记下吸光值
    (5)比较3,4项的两个记录值,不就一目了然吗?

    jbz1124(jbz1124) 发表:空白溶液的透光度由18.7%调整为T%=100;
    尿素样品的吸光度A=-0.113

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  • 天天洗碗

    第8楼2011/03/27

    样品室内任和物品不放,调零,此时,仪器的吸光度为0

    还可以不放样品啊

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  • 夕阳

    第9楼2011/03/27

    应助达人

    什么意思?

    天天洗碗(binglang1985) 发表:样品室内任和物品不放,调零,此时,仪器的吸光度为0

    还可以不放样品啊

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  • wolfly2007

    第10楼2011/03/28

    一、楼主的操作估计有问题,调零没做好,标准曲线没有做
    二、还有一个可能的原因是试样的浓度过大,已经超过你所测标准曲线的范围,这时候的吸光度是不准的,请稀释后重试。
    三、吸光度最大的时间把握,一定要在刚刚冷却后测,最好先对样品进行个扫描,找出最大吸光度时的波长,然后测,一般这个样品的最大吸光度波长是423nm左右,并不是国标里的425nm,建议仪器允许的做相关操作

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