【讨论】如何建立固相萃取方法

首先，等电点的概念只适用于具有双偶极结构的物质，例如：氨基酸具有酸性的－COOH，又具有碱性的－NH₂，在它们的纯水溶液中（不加其他酸碱），虽然有酸、碱的部分离解，但结果主要是质子转移到氨基上，变成－COO^-和－NH₃⁺，分子中的正负电荷中心不重迭，称为双偶极结构。它们的等电点就是中性分子水溶液的PH值，一般计算简式为：
pl=(pK_a+pK'_a)/2
这是两性物质的PH计算最简式。 pK'_a是氨基共轭酸的酸常数负对数：
pK'_a＝14.0－pK_b

其次，如果你的这个化合物类似于柠檬酸之类的三元酸，它是没有等电点的，因为它在水中总有离解，总带负电，永无电中性的状态（中性分子的纯水溶液也要离解而带负电！），纯粹的三元弱碱，也没有等电点；它们的任何酸式盐虽然也有酸式离解和碱式离解的两种趋势，但都没有双偶极结构（要么是带负电的离子，如HCO₃^-，要么是带正电的离子，在离子内部不会有电中性的结构）。
两性物质的PH值（括号内为PH理论近似值）：
H₂A^-（5.25）
HA^2-（8.35）
通过调整溶液PH值，可以改变四种存在形式的浓度比（以前我在论坛中发过一个分布分数的帖子，PH值与浓度比的变化关系曲线），从而调整它们在柱上的保留值。