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【求助】未知物质的大概判断

红外光谱(IR)

  • 悬赏金额:50积分状态:已解决
  • 大家好!近期实验过程中遇到一个问题,想请教大家,希望大家能多指导,谢谢大家!

    我用氯仿-甲醇法提取样品中的总脂,用水洗涤,氯仿相减压浓缩得到样品总脂,总脂用丙酮洗涤三次,收集白色粉末状丙酮不溶物(脂质中的丙酮不溶物主要为磷脂和糖脂,但分析后两者都不是)。该丙酮不溶物具有如下特性:(1)不溶于丙酮和水,在甲醇和二甲基亚砜中的溶解性较差,但易溶于正己烷、乙醚、二氯甲烷、氯仿和硫酸(硫酸中颜色有变化,棕色应该是反应了);(2)正己烷最大紫外吸收峰211nm、氯仿263nm、乙醚228nm、二氯甲烷233nm(溶剂都做了空白对照);(3)TLC层析,在高浓度点样的情况下,碘、10%硫酸-乙醇、茚三酮、dittmer-lister试剂、萘酚-乙醇等显色剂不敏感,显色效果较差(显色灵敏性没有一般脂质来的高);(4)红外谱图请见附件,红外2359和2341好像是二氧化碳,但分析起来说不通,具体情况还希望高手帮忙解释一下。

    样品绝对不是硅胶或无机盐,这点是可以保证的;同时核磁方面也正在做,五一之后会有结果。

    希望大家有类似经历的能指导一下,这种物质大概属于哪一类,这样研究就有一定的针对性了,目前比较盲目;希望大家能多交流指导,有什么意见还望不另赐教,再次谢谢大家!

zengzhengce163 2011/04/30

将其溶于氯仿中,加入醋酐和浓硫酸,看看颜色变化,如果颜色是由浅红色——蓝紫色——绿色变化,就可能是不皂化物。

附件:

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  • louqm2005

    第2楼2011/04/29

    不是,我是做常规脂质分析的,以前经历的都是很常规的东西。总脂中的丙酮不溶物一般都是糖脂或者磷脂;但目前研究的生物样品,丙酮不溶物不是糖脂或磷脂,也不知道是什么东西,所以现在一头雾水,希望高手能大概指点一下。

    ghcily(ghcily) 发表:好像化学猜谜啊

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  • zengzhengce163

    第3楼2011/04/30

    是什么样品?怎么确定不是磷脂和糖脂?那是不是不皂化物?

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  • dahua1981

    第4楼2011/04/30

    应助达人

    这个比较难啊

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  • louqm2005

    第5楼2011/04/30

    样品是别人送来的,具体不是很清楚,应该没添加什么东西吧。

    磷脂:dittmer-lister试剂不显色,消化后测无机磷几乎没有,可以说明没有磷脂,或磷脂含量极低。

    糖脂:水解后测糖,糖脂总有糖吧,没测出来;同时没有糖脂的特征脂肪酸;TLC后用通用显色剂显色,颜色和Rf值不对,说明不是糖脂。

    我个人也倾向于不皂化物,但溶解性方面也不好解释;不皂化物在丙酮中的溶解性还是可以的,所以现在很纠结。如果能将其归属于哪类物质确定下来,略有点头绪,这样就可以了。

    希望大家多交流指导,祝大家节日快乐!

    zengzhengce163(zengzhengce163) 发表:是什么样品?怎么确定不是磷脂和糖脂?那是不是不皂化物?

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  • zengzhengce163

    第6楼2011/04/30

    将其溶于氯仿中,加入醋酐和浓硫酸,看看颜色变化,如果颜色是由浅红色——蓝紫色——绿色变化,就可能是不皂化物。

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  • louqm2005

    第7楼2011/05/01

    今天做了上述实验,颜色为浅棕红色,后续没有颜色变化;同时用甾体作标准品进行了TLC,Rf值对不起来,因此可以肯定该丙酮不溶物不是甾体类物质。

    并且该丙酮不溶物占到总脂的15-20%,量很大,如果少的话也就放弃了,现在骑虎难下,悲剧中;明天采用HP-5MS的柱子做气质,但具体如何衍生什么的毫无头绪,只能都上了。

    希望有相关经历的人能指导一下,谢谢大家!

    zengzhengce163(zengzhengce163) 发表:将其溶于氯仿中,加入醋酐和浓硫酸,看看颜色变化,如果颜色是由浅红色——蓝紫色——绿色变化,就可能是不皂化物。

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  • butterfly2007

    第8楼2011/05/05

    你的图谱看起来象是某种酯类,还是长链的。为什么不溶解于丙酮不好解释。

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  • zengzhengce163

    第9楼2011/05/06

    看图谱确实有酯羰基存在

    butterfly2007(butterfly2007) 发表:你的图谱看起来象是某种酯类,还是长链的。为什么不溶解于丙酮不好解释。

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  • louqm2005

    第10楼2011/05/06

    这个基本是可以确定的,但其就是不溶于丙酮。红外好像没有羟基,应该不是甘油一酯或甘油二酯(甘油一酯不衍生就可以直接在气质中检测,而我这个物质无论衍生与否,气质都检测不出;且甘油二酯在有机溶剂中的溶解性比甘油一酯好)。同时我们做了大量的气质实验,发现这种物质直接进样不出峰,HCl-甲醇甲酯化后,用正己烷萃取,正己烷相通过气质可以检测出大量的脂肪酸,而析出的大量不皂化物在气质中又不出峰(HP-5MS的柱子,炉温都达到300度并保持了很长时间,都没有出来;同时甲酯化衍生是比较彻底的)。

    现在做了氢谱和碳谱,由于我主要是做质谱的,核磁解谱这方面还需要大家多指导;有兴趣的高手,请留下邮箱,我把核磁数据发过来,帮我看看,谢谢大家了!

    zengzhengce163(zengzhengce163) 发表:看图谱确实有酯羰基存在

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