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【求助】在梯度洗脱的时候一般用多少柱体积平衡？

  • inin笨笨猫
    2011/05/03
    • 私聊

液相色谱（LC）

  • 如题：在梯度洗脱的时候，需要用初始比例冲洗，使系统回复到初始状态，请问这个梯度周期的平衡时间一般是多少？
    有不少人说要用10~30的柱体积平衡，但是一般15cm*4.6mm的C18的一个柱体积是2.5mL，假如要用10个柱体积，用1mL/min的流速冲洗那不是起码半小时？难道每次进样后都平衡半小时才走下一个样？有点不符合实际，想问一下大家一般用多长时间平衡再进下一个样的？
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    +关注 私聊

  • ruiyanchun

    第1楼2011/05/04

    没算过，一般看基线，平直了就可以走下一个梯度了

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  • zhaohua8011

    第2楼2011/05/04

    一般3倍的柱体积就可以，你也可以改变洗脱的梯度以节约时间！

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  • inin笨笨猫

    第3楼2011/05/18

    假如是250mm的普通C18柱，1mL/min的流速就是大约7、8分钟，那好像也挺久的，你们平常做实验就冲那麽久？

    zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:一般3倍的柱体积就可以，你也可以改变洗脱的梯度以节约时间！

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  • fayzua

    第4楼2011/05/18

    一般是等压力回到起始之后再加5min

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  • 有水有渝

    第5楼2011/05/18

    应助达人

    一般从比例回复到初始比例后过10分钟

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  • 雪妖

    第6楼2011/05/18

    一般是会到初始比例15min（250mm）柱长
    期间的平衡时间和填料的比表面积有很大的关系，比表面积越大，需要的时间就越长，如果平衡后走第二针的保留时间与第一针相差比较大的话，那中间的平衡时间就需要加长

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  • chwembiology

    第7楼2011/05/24

    一般我们1-2个柱体积，压力回复稳定即可，25cm*4.6mm的C18 大概6分钟

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