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【讨论】晒晒氨基酸分析图谱……

液相色谱(LC)

  • 刚才看到一个帖子讲的是柱前衍生检测氨基酸法
    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110422/3265100/index.shtml


    那我们来晒晒柱后衍生法检测氨基酸吧?
    要求:
    1、有样品图谱(最好说明是什么样品的)
    2、有分析条件
    3、有试剂条件(原装进口的还是自行配制的)
    4、分离柱条件(分离柱尺寸、原装柱还是自行填装后的)

    我先来:



    条件
    1、培养基中氨基酸
    2、蛋白水解法
    3、仪器安装时带的原装试剂
    4、仪器安装时带的原装柱子

    稍后再传几张自己配置试剂和自行填装柱子后的图谱,还请大家多多指教啊!
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  • 风烟

    第1楼2011/05/14

    分析离的不错啊!我们以前也有做过18种氨基酸分离,使用的是Waters 的分析包。

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  • yinbing

    第3楼2011/05/14

    如果自己配的缓冲液也能达到原装试剂的效果就好了

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  • kylabs

    第4楼2011/05/15

    那来个LCMS的吧,没有衍生的,19种氨基酸
    Method Run Conditions:
    Column: 2.1 x 150 mm Cogent Diamond Hydride™
    Solvent A: DI water + 0.1% formic (or acetic) acid
    Solvent B: Acetonitrile + 0.1% formic (or acetic acid)
    Flow rate: 0.4 mL/min
    Gradient conditions:
    0 min - 100 %B
    0-5 min to 75% B
    5 - 6 min to 60% B
    6 - 7 min hold 60% B
    7 - 9 min to 50%B
    9 - 10 min hold 50%B
    5 min post time at 100%B (for equlibration)

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  • 老多_小多

    第5楼2011/05/16

    有样品处理的经验分享下吗

    kylabs(kylabs) 发表:那来个LCMS的吧,没有衍生的,19种氨基酸
    Method Run Conditions:
    Column: 2.1 x 150 mm Cogent Diamond Hydride™
    Solvent A: DI water + 0.1% formic (or acetic) acid
    Solvent B: Acetonitrile + 0.1% formic (or acetic acid)
    Flow rate: 0.4 mL/min
    Gradient conditions:
    0 min - 100 %B
    0-5 min to 75% B
    5 - 6 min to 60% B
    6 - 7 min hold 60% B
    7 - 9 min to 50%B
    9 - 10 min hold 50%B
    5 min post time at 100%B (for equlibration)

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  • GG

    第6楼2011/05/16



    条件
    1、这个是标准谱图,不是样品图谱
    2、生理体液法120分钟
    3、仪器安装时带的原装试剂
    4、仪器安装时带的原装柱子

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  • GG

    第7楼2011/05/16


    条件
    1、自己第一次配置试剂后的标品图
    2、蛋白水解法
    3、购买国产试剂,自己第一次配置
    4、自己重新填装后的分离柱

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  • 色色猪

    第8楼2011/05/16

    1、这是标准品的谱图
    2、分析条件:异硫氰酸苯酯衍生,自己的方法,不是分析包
    3、试剂条件:国产普通试剂
    4、分离柱条件:岛津自带原装C18柱子,25cm

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  • GG

    第9楼2011/05/16

    可否说下,一根C18的柱子能做多少个样啊?

    色色猪(huangqining) 发表:1、这是标准品的谱图
    2、分析条件:异硫氰酸苯酯衍生,自己的方法,不是分析包
    3、试剂条件:国产普通试剂
    4、分离柱条件:岛津自带原装C18柱子,25cm

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  • kylabs

    第10楼2011/05/17

    我估计这个样品是标样的结果。我见过相同分离条件做代谢组的,样品处理很简单,细胞培养液沉淀蛋白,离心,取上清,就直接做了。因为是TOFMS做的,所以不需要在意其他杂质的干扰。

    老多_小多(emoc98311) 发表:有样品处理的经验分享下吗

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