【求助】[江湖急救令]：关于液相色谱的问题

mai1985

2011/05/14

私聊

液相色谱（LC）

赏
悬赏金额:20积分状态:已解决

嗯嗯。。。（清嗓中。。。）
来令生，杰特们，高手们，大家好：
我是刚学液相色谱的新菜鸟，在学习过程中遇到了种种我无法忍受，快要抓狂的问题，通过摆渡很偶然的来到了高手如林的风水宝地--仪器网，依稀间，我仿佛看到了无尽的黑暗中，一轮冉冉初升的太阳。。。（以下5928个字因为太过肉麻，己被管理员删除）
在此道一声万福了，如果有能解决问题的方法，在下不胜感激。。。
问题一：

如图所见，在2。5min的时候出现了一个倒峰，（不好意思，图谱我调不出来，用WORD等工具都不行，也复制不下来，一怒之下就用手机拍下来了，不太清晰，见谅啊）我以为是流动相或者样品里面有杂质，于是换，连换了三次，包括进样器都用甲醇清洗了好几遍，也还是不行，顽固不化的倒峰还是在2。5min的时候准时到来，顺便说一下我的情况：岛津高效液相SPD-20A，流动相0。3%硫酸钠，样品H-酸单钠盐。基本情况就这样了，求各位高手帮帮忙。

问题二：
基线不稳：不是向下飘就是向上飘，我说你要飘也往一个方向飘啊，五分钟前向下飘，五分钟后就向上飘了，开机都一二小时了，什么时候稳定下来呢？

问题三：
新柱子压力太高：我换了别的柱子，完全OK，一换新柱子压力就高，堵了？不可能吧，那可是新的，二千多块一根啊，我翻了翻以前的论坛，有同学说把柱子反冲一下，可是我不敢啊，又不是旧柱子，这能行吗？会不会冲坏啊，还有的说用什么冰醋酸什么什么的，我这里没有那材料啊，请问还有别的方法吗？

wyj2008a 2011/05/14

几点建议： 1、首先楼主可以用拷屏的办法来获取谱图，在显示屏上将谱图调至合适的尺寸，按[PRT SC]，然后黏贴在word文档或画图板上保存即可。 2、从谱图上看，峰的分离情况不好，可以在分离条件上下些功夫调调，可能会更好。 3、楼主能否传个完整的谱图上来，大家也好帮你解决问题。

flhszf 2011/05/14

问题一：色谱图中的倒峰且在3分钟以前一般为溶剂峰，如不影响结果就不用管它。上图疑似为甲醇峰，可以进一针甲醇看一看验证一下。问题二：无法看到坐标单位，建议做个截屏看一下再判断。问题三：请详细阅读色谱柱说明书，不同色谱柱在使用相同流动相的压力是不同的，有的会差别很大，看一看说明书中出场报告使用的流动相和压力于现在是否相符。

cat & bird 2011/05/16

问题一、这个倒峰应该是SPD-20A检测器灵敏度相关的，基本上不用考虑消除；问题二、新柱子很有可能出现出现类似情况，考虑用低流速如0.2ml/min连续冲24h。问题三、新柱子的压力多大，如果不进样超过12MP可以考虑用甲醇、乙腈低速(0.05ml/min)反冲,这个本人试过，不会对柱子造成损害。

huang136 2011/05/16

关于基线的问题： 1、你的流动相超声处理了没有？如没有，进行超声处理 2、将泵停掉，查看基线是否正常？如正常，说明是泵出现问题 3、检测波长是否设定在仪器检测极限值附近 4、检测池是否被污染 5、单向阀可能出现问题暂时就能给你怎么多建议，希望能对你有帮助关于柱子的问题我没接触到，不好给建议了

依旧 2011/06/07

样品用流动相溶解可减小或消除倒峰，那个峰实际上就是溶剂峰。基线偏移的原因有很多如；1系统没有平衡好 2环境温度的变化 3检测器是用空气做参比强的空气对流也会引起基线的微小变动。4，流动相。只是个人经验