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【求助】液相方法检测没出峰？怎么解决才好？？？

jianfkunzhong

2011/06/10

液相色谱（LC）

如何测番茄果实中类胡萝卜素含量

昨天按照外文文献上的方法提取了番茄果实中的类胡萝卜素，用 C18的色谱柱跑液相，没出峰，该柱子是Agela Venusil MP C18的，4.6mm*250mm，填充物是硅胶，之前我们实验室有人用它测叶黄素，跑的标样和样品还行，到了我就不出峰了，一直老是基线状态，我用的流动相是甲醇和水，用乙酸乙酯回溶的样品，不知道是不是流动相不对，请教各位大侠！
另外，我刚开始接触，不大懂，我想知道测类胡萝卜素除了用C30的专用柱，如果用C18的应该选什么填充物的，流动相用什么？如果有哪位高手测过，还望不吝赐教方法!万分感谢！ MTBE可以做C18柱子的流动相吗？

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河浪

第1楼2011/06/10

乙酸乙酯的截止波长蛮大的，能不能用其他溶剂代替？
或者挥发干乙酸乙酯再用其他溶剂溶解胡萝卜素
这个具体没测过，纯属参考哈哈

0

zgkzgk

第2楼2011/06/10

可能是色谱峰出峰太晚，结果摊平了。也可能是你采集的时间短了，
试一下直接用甲醇洗脱，将样品的采集时间延长到1小时。胡萝卜类其保留时间较长。

0

hudayaoxue

第3楼2011/06/11

应该是没有出来。

你提个问题就说清楚啊？甲醇与水的比例是多少？

甲醇少了跑不出来的。有时纯甲醇都跑不出来，就要考虑用乙腈了。

你自己先好好把理论研究清楚再来做啊，总不能往那仪器前一站，找篇参考文献当手纸一样，就开始做液相啊，那是纯农民啊。

0

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