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【讨论】昨天安装仪器时想到一个问题，像专家请教！

ghostermen

2011/06/11

紫外可见分光光度计（UV）

比如有一个溶液，空白的吸光度是2.0ABS，如果用单光束仪器的话，把此空白放进去，软件调零，再测样品，实际样品的吸光度都是2-3ABS之间，肯定测不好，但是如果是双光束仪器，先在样品和空白处都放2.0ABS的空白调零，然后将样品处比色皿取下，换上2-3ABS之间的样品，这时候能测得准吗，多谢！

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tutm

第1楼2011/06/11

你写的双光束仪器中的“空白”是指靠里面的那个位置吧，那只是用来补偿仪器和溶液温度漂移的。真正测试还是在靠外面样品位置的参比（或空白）溶液与样品溶液比较，因此测试的情况与单光束仪器一样。除非是双光束仪器的杂散光等指标更好些，那才能比单光束仪器测得准些。

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ghostermen

第2楼2011/06/11

意思是参比光路只是会补偿光源波动等，空白高了还是不行，谢谢了！
tutm(tutm) 发表:你写的双光束仪器中的“空白”是指靠里面的那个位置吧，那只是用来补偿仪器和溶液温度漂移的。真正测试还是在靠外面样品位置的参比（或空白）溶液与样品溶液比较，因此测试的情况与单光束仪器一样。除非是双光束仪器的杂散光等指标更好些，那才能比单光束仪器测得准些。

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jixf_1114

第3楼2011/06/14

还是一样的测不好，不同仪器都有一个吸光度检测的范围，这个在产品手册上就有。比如-3到3，那么这个数值是空白与样品的总和。按照你所述，空白溶剂相对于空气为2，样品相对于空白溶剂为2，实际相对于空气的总吸光度为4，已经是很多仪器的范围之外了。

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