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关于染料的激发和发射谱

分析化学

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  • 最近在对手里的几种染料扫描吸收和发射谱,其中一种是常用的SYBR GreenⅠ,给定的激发和发射波长分别为494nm和530nm;但是在扫描时我固定激发波长494nm时,它的发射峰的位置不是在530nm附近,而在500nm附近,这就与提供的不一致,不知道问题出在哪里,谢谢

老化验工 2011/06/15

相差30nm,倒是出奇的蓝移了。请问你测定染料光谱的溶剂条件与资料上的相同吗?例如,溶液的酸碱性,溶液中除染料以外还有其他可以配位的离子或分子等,它们影响了产生荧光的π-π*跃迁能级差,如果降低了共轭程度,可能跃迁能量就会增大,导致发射光谱蓝移。所以,你先检查一下溶液体系的影响,检查是否与资料一致。

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  • dahua1981

    第1楼2011/06/14

    应助达人

    一般仪器都是有略微差别的,波长相差1nm左右还是可以接受的

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  • 老化验工

    第2楼2011/06/15

    相差30nm,倒是出奇的蓝移了。请问你测定染料光谱的溶剂条件与资料上的相同吗?例如,溶液的酸碱性,溶液中除染料以外还有其他可以配位的离子或分子等,它们影响了产生荧光的π-π*跃迁能级差,如果降低了共轭程度,可能跃迁能量就会增大,导致发射光谱蓝移。所以,你先检查一下溶液体系的影响,检查是否与资料一致。

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  • 老化验工

    第3楼2011/06/15

    你可以将条件逐项地改变,尤其是PH值(如缓冲溶液体系等),看看是谁在影响。如果你纯粹是用水溶解的染料溶液,那么资料上的方法是不是也用水直接溶解?

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  • 我的8090

    第4楼2011/06/18

    做好查查资料!一般不会有这么远的差别!自己在根据激发和发射来做做,看看!

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