生物质谱
maldiguy
第1楼2011/06/23
我个人觉得仪器的问题的可能性比较小应该是在分离提纯中出了问题,你要的东西可能没提纯出来
goldendays
第2楼2011/06/24
你用标准品做过对照没?MALDI TOF要记得及时校验的。校验不及时,得到的结果会很意外的
hwd6218554
第3楼2011/08/15
即使没有标准品校准,在1万以下的范围,MALDI也不会有2000Da的差距的,你看看在样品获得过程中是否出问题,你先可通过别的方法验证是否获得你表达蛋白,再做分子量测试。
liufeilzu
第4楼2011/08/22
跑个page胶,不过2kda 的分子量差别有点小,调整TOF的激光能量试试
daoyuanli
第5楼2011/09/02
应该是样品的原因吧。你的蛋白有没经过纯化?怎么会有这么多杂峰啊MALDI-TOF的峰一般是带一个单位的电荷,但有时也会有带两个单位电荷的,这样7.4k,有可能在3700左右会有峰。下面这个图是我以前做过的BSA的MALDI-TOF检测图谱,几个峰都是BSA的,只不过是因为带的电荷不同罢了。不过这个MALDI-TOF的分辨率也太差了吧?什么公司?什么型号的?
第6楼2011/09/03
我们用得ABI的4800在8000Da以下,误差在20ppm以内,有时仪器状态好的话可以做到10ppm以内,也就是说如果目标分子的分子量为8000Da,其误差应该是在0.08Da以内。而在20000-200000Da,误差一般在100Da以内,有时也会达到200Da,不过这个时候仪器给的分子量其实是一个平均分子量,这个时候仪器的分辨率下降,同位素峰分不开,就像上面的BSA,给的分子量是66442.9375Da,其实只是一个平均分子量,并不是一个精确的分子量。
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