液相如何用超纯水过渡缓冲盐

用超纯水过渡是为了保护色谱柱，因为色谱柱保护液一般都是高浓度的有机试剂，你的流动相含有盐，不过渡的话，盐容易在高浓度的有机试剂中析出，从而影响色谱柱的寿命。

具体做法，你可以使用面板操作，把四个通道的任何一个设置成100%都可以，然后把设置100%通道的换上高纯水，用0.5的流量冲洗，有10分钟就可以了，然后你再用流动相平衡柱子即可。最好你的流动相和高纯水使用不同的通道，具体流动相使用的是哪个通道看仪器方法的设置。

100% 超纯水会不会洗塌柱子，可不可以用90%水+10%甲醇。

以A甲醇、B水、C乙酸铵为例，我们常用的做法是：
100%甲醇20分钟，然后10%甲醇+90%水20分钟，然后5%甲醇+50%水+45%乙酸铵20分钟，最后5%甲醇+95%乙酸铵至系统平衡。

设A为水，B为有机相；先用水和有机相冲柱子，水和有机相的比例与缓冲盐和有机相的比例相同，把色谱柱平衡好；然后停泵，把冲水的泵头放到缓冲盐中，排气泡，然后调好缓冲盐和有机相的比例及流速冲柱子，基线平稳后即可进样分析；样品做完后，用100%的水0.5以下的流速冲柱子30分钟以上（如果柱子可以用纯水冲，可以多冲一会把盐冲干净），然后换成水和有机相冲柱子（按照上缓冲盐之前的比例）约30分钟，最后换成纯有机相冲柱子约30分钟即可。

液相常识：在使用缓冲盐流动相时，需要用水过度，原因：盐不溶于有机溶剂，在有机溶剂里会结晶出来，堵塞柱子，或磨损密封圈。所以要用水过度，但不一定是100%的水，大比例的水就够了如80%—95%不建议用纯水，因为你的柱子不一定是水性柱，走纯水时间久了柱效会降低。可以先90%的水走30分钟后在换甲醇。

我这儿用的8：92的甲醇水作为过渡。
流动相：160ml甲醇+10.44g磷酸氢二钾，溶解成2000ml，然后用磷酸调节PH到6.7

5楼说的非常对哈

用超纯水过渡是为了保护色谱柱，因为色谱柱保护液一般都是有机试剂，如果流动相含有盐，不过渡的话，盐容易在高浓度的有机试剂中就会析出，从而破坏色谱柱的结构构造，影响其寿命。

具体做法，有机试剂和缓冲盐交换前先用0.5ml/min流量的高纯水冲洗，有20分钟就可以了，然后你再用流动相平衡柱子或用甲醇乙腈之类的有机试剂保存柱子即可。

用10%的甲醇冲盐效果也可以的，有的柱子不能用纯水。