菲罗门色谱柱柱压问题请教！

参考一下http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20090831/2088286/
个人建议如果是柱压上升太快，就把柱子反向0.2-0.5的低流速异丙醇冲试试

感谢您的回复， 我的这根色谱柱的这种情况，主要原因是堵塞吗？冲洗修复的几率有多大？

使用异丙醇冲洗之前和之后要用什么样的溶剂来置换呢？我之前使用完毕后， 柱子保存在纯乙腈中，因为今天要用，所以昨天晚上用异丙醇0.2的流速正向冲洗了1.5小时， 后用100%乙腈0.5流速冲洗了4小时， 可是今天使用的时候， 发现压力升到了3400，（上次使用的时候是3100左右），不知道使用异丙醇的时候要用什么样的梯度，是不是我的操作有疏忽？但是看很多资料都是这么说的， 使用完异丙醇后，用纯乙腈冲洗就可以了， 而且今天使用的时候， 发现我的图谱基线很不稳， 进样之前很好， 开始走样品后就不行了， 噪音很大，不知道是什么原因。我今天的样品还是用0.45的膜过滤了的！！

确定是色谱柱产生的压力吗？

卸下色谱柱，看系统压力，如果系统压力比较高，那就有可能是在线过滤器的原因

如果是色谱柱堵了，反冲确实有效果，但是并不是所有的柱子都能反冲，建议你先问一下厂家工程师

菲罗门的柱子工程师说可以反冲，我用的小流速反冲的，柱子的分离度和塔板数没有下降！塔板数还在10500左右， 跟原来一样。确定是柱子的问题， 不是系统的问题。
之前原料药确实是没有过膜，就是用纯乙腈溶，然后超纯水稀释至刻度，就直接进样了。如果是柱子被样品堵塞了， 有什么好的解决方法吗？我昨晚用75%的乙腈小流速反冲了一晚上， 柱压没有丝毫的改变！之前10%~100%乙腈梯度洗脱也用过了，也没有效果！
所有应该注意的地方都注意了， 但是我们这里原料药大家都是不过膜直接用，从来没有出现这种情况，所以我一直没有对样品过滤，我现在也担心是样品里面有杂质，或者溶解性不是特别好， 有少量析出，梯度洗脱、异丙醇小流速冲洗、小流速反冲等常规方法都用过了，都没有起色， 我正在考虑是不是要把柱头卸下来超声，不知道有没有哪位大侠有更好的方法！先在此谢过了！