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探究中间体分析方法中遇到的问题极其解决

蓝人

2011/09/03

液相色谱（LC）

手上正在探究几个中间体的分析方法，现将其中的一个或几个问题，跟大家分享下，希望对大家有所帮助（谱图稍后传上）

样品：中间体（合成提纯后样品，没进行定量分析，理论认为纯度较高）

分析方法一、
流动相：乙腈+水=60+40 流速：1.0ml/min 波长：280nm 恒流岛津LC-10AD 无在线脱气装置
流动相超声，脱气，柱平衡后进样，压力72Kgf/cm2
见谱图（乙腈）

分析方法二、
流动相：甲醇+水=70+30 流速：1.0ml/min 波长：280nm 恒流岛津LC-10AD 无在线脱气装置
流动相超声，脱气，柱平衡后进样，压力115Kgf/cm2
见谱图（甲醇）

根据谱图情况分析方法的优越性，极其考虑过程：
拿到样品，先了解样品的一些理化性质，稳定性，然后做个UV确定下最大吸收波长（因样品不是太纯，测的有两个）
备注：大家注意下最大吸收波长和合适吸收波长这两个概念，合适吸收波长一般在最大吸收波长上下20nm左右，一般我们用的波长都是合适吸收波长，根据谱图进行调节；一般针对原药和含量超低的选用最大吸收波长。
确定波长后，就要选择流动相和色谱柱。80%的化合物都可以用C18 这里我就不多说了
流动相,首先选择乙腈，因为乙腈的洗脱能力强，出峰较快，能较块的知道效果，然后在进行实际情况微调。
我选择乙腈和水做流动相，进行微调后，发现分离效果不错，但是峰形却相当不好看，中等程度的拖尾。见谱图（乙腈）
通过加磷酸，不断调试PH，但对峰形没有多大影响。

后改用甲醇水做流动相，出峰效果非常好，见谱图(甲醇)
至于用甲醇代替乙腈，为什么能取得如此的效果，我是这样理解的，因为为了达到同样的保留时间，不更改其他条件的情况下，提高有机相的浓度，有利于峰形改善。
现在确定分析方法二为本产品的分析方法。

补充：UV测得两个波长，一个是270nm，一个280nm，用270nm定为检测波长时，发现主峰钱有个峰，峰高较高，影响美感，而用280nm则不会有此情况，所以确定为280nm。见图（E-3）

附件：

乙腈.pdf
甲醇.pdf
E-3.pdf

分
该帖子已被版主-zhaohua8011加3积分，加2经验;加分理由:分享，建议附图！

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蓝人

第2楼2011/09/03

应助达人

图在公司电脑今天周末下周考下
再传
老多_小多(emoc98311) 发表:楼主的帖子把图补充好就可以参加原创大赛啦，图呢？

0

xiaowang268

第3楼2011/09/06

提高有机相的浓度，有利于峰形改善。
这个在实验中能感觉到，但是原因？

0

老多_小多

第4楼2011/09/06

你的图建议你直接截图，放在内容中，这样利于你的评分哟

0

sanbu830317

第5楼2011/09/06

选用280nm是不是不太合适啊？

0

蓝人

第6楼2011/09/06

应助达人

5楼为什么不合适？？？

0

有水有渝

第7楼2011/09/06

应助达人

合适检测波长选择相差20nm的依据是什么，我一般会选择相差2nm，相差太大，灵敏度可以不足，而且有机合成中间体检测一般为了监测合成进程，都尽量检测到多的样品峰，楼主为了美观却去改变检测波长不是很科学。楼主选择230nm检测会如何呢，看色谱图用乙腈拖尾，用甲醇前延，是否考虑使用乙腈，甲醇混合溶剂做流动相的有机相。

0

蓝人

第8楼2011/09/06

应助达人

甲醇前沿？
合适波长一般是最大波长的20nm
是查阅相关文献资料的
在农药产品这块大部分都是，除了我提到的一些外
更换波长确实可以使谱图美观，但是不一定使某些杂志检测不出来
这是根据需要的
一般产品出来的，我们要的是原药！杂志是有限的
其他剂型的话，都是自己调整的！

0

liufeilzu

第9楼2011/09/07

这个不是绝对的

0

sanbu830317

第10楼2011/09/07

280nm的吸收太小了吧

0

蓝人

第11楼2011/09/07

应助达人

那您的意思应该选择波长应该选择多少？
指教一二
谢谢

0

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