【华山论剑第五十八集】如何优化液质的梯度洗脱程序？

很中肯. 现在很多做LCMS的基本上没有梯度洗脱的概念, 很多人认为, LCMS的梯度就是在3~5内,有机相0到100.

不能因为质谱的选择性高，就把色谱分离给弱视了。
梯度，色谱柱，流动相，是色谱分离的主要因素。
单个化合物比较好弄。
一次采集多个化合物时，分离不理想，要么把上升梯度拉的很缓，让化合物分开；也可以设置多个梯度，比如c18柱，ACN-H2O，有的化合物水相高出峰，有的化合物有机相高出峰，搞两三个梯度串起来，让他们在各自合适的时间出峰。

梯度的设置很有必要，一方面可以有效缓解基质效应，另一方面可以使复杂样品中大多数组分尽可能冲出色谱柱，提高色谱柱使用周期，还有就是流动相组成的变化会影响化合物响应。确实比起质谱条件优化来讲，色谱条件的优化更复杂一点，可能不同的样品色谱条件亦有所不同

一般反相的话，有机相20-80进一针看出峰情况，然后换梯度，柱子，流动相等等，还是要根据化合物根据经验来的。



这个题目太大了点。

做蛋白质组学，一般照文献设置个超长的缓慢变化梯度，我这个每次实验成本有点高，没有比较梯度变化后峰的情况，主要是样品珍贵。我觉得用LCMS要药物代谢和动力学的类似DMPK的可以谈谈

反相梯度洗脱中，分离各种磺酰脲类除草剂时，有机相一般用一定配比的甲醇和乙腈（1:1或3:1），水相用20%甲醇酸性水溶液或20%乙腈酸性水溶液。柱子一般选C8和C18，就能满足分离要求。

刚开始接触液质，学习中

都有这么多头衔了也应该是个老鸟吧, 什么还这么谦虚也说是才学习中呢?

应助达人

通过组分的性质来初步判断,再通过实测改变条件.不断优化洗脱程序.