进样量不一样，为什么峰分不开？（已经解决了O(∩_∩)O~感谢各位）

应助达人

流动相是什么，样品溶剂又是什么？

样品溶剂是甲醇

我用的是梯度洗脱，
0min 甲醇是20% 0.3%的磷酸水80%
5min 20 80
10min 32 68
20min 45 55
40min 68 32

建议：
1、调节流动相的起始有机相比例，降低有机相比例，增强保留。
2、适当降低样品中有机相的比例。
这个属于样品中化合物的分相。

应助达人

我估计应该是跟PH有关系

PH也是影响样品中化合物在两相中的溶解度，这也是一个方法。

浓度大，手动进样，若操作稍有不甚就有很大影响！
进样体积过大，会导致峰展宽，导致过载，进而引起不能分开，建议改变浓度和进样体积使合理！

你的意思是 让我把水的比例调大一点是吗？

我已经把浓度稀释的很低了，那只能是体积的事了 但是进10ul的话 峰面积又不准了 咳 很无奈

梯度起始的水相比例调大一点，增加化合物的保留，或者溶解样品时用50％的有机相（溶解度允许的话），建议都试试。