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第1楼2011/09/17
(三)蛋白质的颜色反应
1.黄蛋白反应
于试管中,加1mL蛋白质溶液和10滴浓硝酸溶液,直火加热煮沸,观察溶液和沉淀颜色。冷却后,再加入20滴10%氢氯化钠溶液,观察颜色变化。
2.与茚三酮的反应
在二支试管中,分别加1%赖氨酸溶液和1mL蛋白质溶液,分别加2滴茚三酮溶液,加热至沸,观察有什么现象?
3.与硝酸汞试剂作用——米伦反应
在二支试管中,分别加1mL 0.5%苯酚溶液和1mL蛋白质溶液,再各加0.5mL米伦试剂(不可太多),苯酚溶液出现玫瑰红色,而蛋白质溶液加热后出现沉淀,加热凝固的蛋白质呈砖红色,有时溶液也呈红色。
4.蛋白质的双缩脲反应
(1) 双缩脲的生成
于干燥试管中,加0.2g~0.3g尿素,微火加热,尿素熔化并形成双缩脲,放出的氨可用红色石蕊试纸试验。试管内有白色固体出现后,停止加热。
(2) 双缩脲反应
上述产物冷却后,加1mL10%氢氧化钠溶液,摇匀,再加2滴2%硫酸酮溶液,混匀,观察有无紫色出现。
于试管中,加1mL清蛋白溶液和1mL10%氢氧化铜溶液,再加1滴~2滴2%硫酸铜溶液共热,由于蛋白质与硫酸铜生成络合物而呈紫色。取1%赖氨酸溶液作对照,观察颜色变化。
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第2楼2011/09/17
(四) 核蛋白组成的鉴定
1.核蛋白的水解
取20mL酵母核蛋白混悬液于离心管中离心分离,弃去清液,将沉淀转入小烧杯中,加15mL 5%硫酸,盖上表面皿在水浴上煮沸约1h(煮沸过程中保持原有体积),水解毕,离心分离,取上层清液作以下检查。
2.核糖的鉴定
于试管中,加1mL 20%间苯二酚盐酸溶液,以小火加热至沸,迅速加入5滴水解液,呈现红色,(如红色不显可再稍加热)。
3.磷酸的鉴定
取10滴水解液,置于试管中,加5滴7%钼酸铵溶液和2滴浓硝酸溶液,小心于火上加热,即有黄色沉淀生成。
4.嘌呤与嘧啶的鉴定
取约4mL水解液,置于小烧杯中,加入氨水至微碱性,过滤,在滤液中加1mL 5%硝酸银铵溶液,静置片刻,即有絮状的嘌呤或嘧啶银盐沉淀生成。
注意事项
米伦试剂是硝酸、亚硝酸、硝酸汞及亚硝酸汞之混合物,能与苯酚及某些酚类起颜色反应。